公开(公告)号：CN1796563A

公开(公告)日：2006-07-05

申请号：CN200410101382.3

申请日：2004-12-21

申请人： 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所

发明人： 田淑芳 ,  阮力 ,  刘文军 ,  杨芙蓉 ,  宗芳 ,  李军 ,  陈红 ,  王文 ,  阮薇琴 ,  王秀平

IPC分类号： C12N15/63 ,  C12N15/13 ,  C12N15/62 ,  C12N15/85

摘要： 在乙肝表面抗原PreS1(21－47)基因片段与S基因的第223位相连的基础上，在其下游引入RNA加聚A信号AATAA、乙肝病毒增强子1(En1)和增强子2(En2)，及突变的x基因(mX)构成pCHBSS1G质粒。将pCHBSS1G质粒与pSV2dhfr质粒转化到CHO－dhfr－细胞，经克隆加MSX及MTX筛选扩增，获得了高效表达乙肝表面抗原S和前S1融合蛋白的一系列基因工程细胞系(GdSS1－X)，SS1融合蛋白在SDS－PAGE中显出27KD蛋白条带，同时可出现30KD蛋白条带，小鼠免疫可产生针对S和S1的特异性抗体。

公开(公告)号：CN1796417A

公开(公告)日：2006-07-05

申请号：CN200410102778.X

申请日：2004-12-29

申请人： 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所

发明人： 李军 ,  阮力 ,  陈红 ,  王文 ,  田淑芳 ,  杨芙蓉 ,  宗芳 ,  张陵林 ,  王秀平

IPC分类号： C07K19/00 ,  C07K1/18

摘要： 本发明建立了哺乳动物细胞CHO－dhfr－表达的含S和前S1乙肝表面融合抗原的纯化工艺流程：细胞培养原液→离子交换柱层析→疏水柱层析→分子筛柱层析，该工艺乙肝表面抗原S和前S1蛋白回收率高，纯度好，保持良好生物学活性，符合乙肝疫苗半成品检定要求。