一种利于七次跨膜蛋白CCR5功能性表达的方法

    公开(公告)号:CN105198983B

    公开(公告)日:2018-11-06

    申请号:CN201510574703.X

    申请日:2015-09-11

    IPC分类号: C07K14/705

    摘要: 本发明涉及一种利于七次跨膜蛋白CCR5功能性表达的方法,其步骤如下:(1)将CCR5外源DNA模版经编码修饰后,插入到载体上,直接添加到无细胞表达体系中,通过添加DNA转录翻译以及蛋白质表达所必需的氨基酸、能量物质、T7聚合酶和表面活性剂,优化实验条件,来实现蛋白质的体外表达。(2)由于在步骤(1)表达CCR5时,膜蛋白易产生聚集形成包涵体或者产生错误折叠的现象,所以在步骤(1)的同时,加入相对应的分子伴侣,为目标蛋白质的正确折叠提供封闭的疏水环境,使所表达的CCR5能够充分的正确折叠,并且提高膜蛋白的可溶性表达量。本发明中CCR5制备设备工艺简单,适合跨膜蛋白质的快速和高通量表达,活性也得到很好得改善。

    一种用于肝癌早期检测的试剂盒及其制备方法

    公开(公告)号:CN109085362A

    公开(公告)日:2018-12-25

    申请号:CN201810814426.9

    申请日:2018-07-23

    IPC分类号: G01N33/68 G01N33/533

    摘要: 本发明公开了一种用于肝癌早期检测的试剂盒及其制备方法,试剂盒包括荧光酶标板、样品稀释液、洗涤液、阴性对照、阳性对照、抗肝癌标志物的单克隆抗体、生物素标记的抗肝癌标志物的单克隆抗体和链霉亲和素-藻胆蛋白荧光探针。本发明用于肝癌早期检测的试剂盒,减少了加入化学底物显色的步骤,操作步骤简单;灵敏度高,副产物少;本发明通过多基因组合表达方式,在大肠杆菌内实现“体内一步法”合成链霉亲和素/藻胆蛋白类融合荧光蛋白,在完成藻胆蛋白标记的同时,保证了融合分子具有稳定的荧光性质,同时该融合蛋白还具有良好的针对生物素化物质的靶向性,从而增强了藻胆蛋白在免疫检测中的应用能力。

    一种利于七次跨膜蛋白CCR5功能性表达的方法

    公开(公告)号:CN105198983A

    公开(公告)日:2015-12-30

    申请号:CN201510574703.X

    申请日:2015-09-11

    IPC分类号: C07K14/705

    CPC分类号: C07K14/705

    摘要: 本发明涉及一种利于七次跨膜蛋白CCR5功能性表达的方法,其步骤如下:(1)将CCR5外源DNA模版经编码修饰后,插入到载体上,直接添加到无细胞表达体系中,通过添加DNA转录翻译以及蛋白质表达所必需的氨基酸、能量物质、T7聚合酶和表面活性剂,优化实验条件,来实现蛋白质的体外表达。(2)由于在步骤(1)表达CCR5时,膜蛋白易产生聚集形成包涵体或者产生错误折叠的现象,所以在步骤(1)的同时,加入相对应的分子伴侣,为目标蛋白质的正确折叠提供封闭的疏水环境,使所表达的CCR5能够充分的正确折叠,并且提高膜蛋白的可溶性表达量。本发明中CCR5制备设备工艺简单,适合跨膜蛋白质的快速和高通量表达,活性也得到很好得改善。