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公开(公告)号：CN106906238B
公开(公告)日：2020-08-14
申请号：CN201510971596.4
申请日：2015-12-22
摘要： 本发明涉及一种链霉菌抗生素生物合成基因簇多拷贝扩增方法及应用。本发明在删减一些不相关基因簇的同时、引入多个attB位点，借助位点特异性重组系统，一次实现目标基因簇多拷贝扩增，大幅提高目标产物产量。本发明的方法不仅操作简单有效，而且工程菌的遗传稳定性良好。
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公开(公告)号：CN105200035B
公开(公告)日：2019-02-22
申请号：CN201410270968.6
申请日：2014-06-17
摘要： 本发明涉及一种DNA体外组装方法，具体地，本发明涉及高GC含量大片段DNA的体外组装方法及应用。更具体地，本发明人利用改进的Gibson组装方法，在体外成功拼接了来自始旋链霉菌的原始霉素II生物合成基因簇，其可适用于高GC含量DNA大片段组装，并可以明显提高组装效率并简化组装过程。
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公开(公告)号：CN105200035A
公开(公告)日：2015-12-30
申请号：CN201410270968.6
申请日：2014-06-17
摘要： 本发明涉及一种DNA体外组装方法，具体地，本发明涉及高GC含量大片段DNA的体外组装方法及应用。更具体地，本发明人利用改进的Gibson组装方法，在体外成功拼接了来自始旋链霉菌的原始霉素II生物合成基因簇，其可适用于高GC含量DNA大片段组装，并可以明显提高组装效率并简化组装过程。
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公开(公告)号：CN106906238A
公开(公告)日：2017-06-30
申请号：CN201510971596.4
申请日：2015-12-22
摘要： 本发明涉及一种链霉菌抗生素生物合成基因簇多拷贝扩增方法及应用。本发明在删减一些不相关基因簇的同时、引入多个attB位点，借助位点特异性重组系统，一次实现目标基因簇多拷贝扩增，大幅提高目标产物产量。本发明的方法不仅操作简单有效，而且工程菌的遗传稳定性良好。
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公开(公告)号：CN110951765B
公开(公告)日：2022-03-08
申请号：CN201811129527.9
申请日：2018-09-27
申请人： 中国科学院分子植物科学卓越创新中心 , 上海医药工业研究院
摘要： 本发明公开了一种系统，其包括：含有多克隆位点MCS、链霉菌启动子kasOp*、整合基因、抗性基因、通用组装接头、SpeI和SwaI酶切位点的第一质粒；含有外源基因簇、整合基因、抗性基因、通用组装接头的第二质粒；CRISPR/Cas9反应体系；Gibson组装反应体系。该系统为即插即用型，可高效地在放线菌基因组上整合多拷贝的天然产物合成基因簇。
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公开(公告)号：CN110857447B
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN201810965937.0
申请日：2018-08-23
申请人： 中国科学院分子植物科学卓越创新中心 , 上海医药工业研究院
摘要： 本发明涉及提高米尔贝霉素A3/A4或其衍生物产量的方法。本发明中，确定了以其基因组中A1和/或A2‑R两段基因簇作为重组克隆的靶标，在菌株中重组表达该两段基因簇，使得米尔贝霉素A3/A4或其衍生物的产量呈现极为显著的提高。本发明还提供了遗传工程化的米尔贝霉素A3/A4或其衍生物的生产菌及其应用。
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