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公开(公告)号：CN114577558B
公开(公告)日：2024-07-26
申请号：CN202011377686.8
申请日：2020-11-30
申请人： 中国科学院大连化学物理研究所
摘要： 本发明涉及一种海洋微生物蛋白质的预处理方法，本发明通过超声裂解破碎微生物，盐酸胍和离子液体从海洋微生物中提取出蛋白质，加入蛋白质还原剂在高温条件下使蛋白质快速变性，加入可与蛋白质巯基快速反应的固相烷基化试剂，该试剂可选择性与蛋白质上的巯基反应，离心后，反复清洗固相颗粒表面去除其它干扰小分子，即杂质(如糖、盐、表面活性剂、脂类等)，获得高纯度的蛋白质，最后加入蛋白酶将海洋微生物蛋白质酶解成肽段后，离心后获得的产物经简单处理后可直接采用液相色谱‑质谱系统进行分析。该方法特别适合细胞壁较厚破壁困难，脂质等小分子干扰严重的海洋单一、混合微生物以及实际站位海洋宏蛋白质组样品的预处理。
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公开(公告)号：CN115487784A
公开(公告)日：2022-12-20
申请号：CN202110670403.7
申请日：2021-06-17
申请人： 中国科学院大连化学物理研究所
摘要： 本发明涉及一种利用富集材料实现生物样品溶液中细胞外囊泡富集和浓缩的方法。所述的富集材料是由具备超吸附功能的聚合物材料作为内核及具有尺寸筛分功能的多孔结构的透析袋作为外壳组合而成。细胞外囊泡可通过透析袋表面的孔径实现成功的拦截，与其共存的干扰物如蛋白质由于尺寸较小可以成功通过透析袋表面被内部的聚合物材料不可逆的吸附，从而实现干扰物质的成功去除，同时由于聚合物材料的强吸水特性可实现大体积样品的浓缩。此种方式可应用于细胞培养液，尿液，血浆等中的细胞外囊泡的富集。
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公开(公告)号：CN114577558A
公开(公告)日：2022-06-03
申请号：CN202011377686.8
申请日：2020-11-30
申请人： 中国科学院大连化学物理研究所
摘要： 本发明涉及一种海洋微生物蛋白质的预处理方法，本发明通过超声裂解破碎微生物，盐酸胍和离子液体从海洋微生物中提取出蛋白质，加入蛋白质还原剂在高温条件下使蛋白质快速变性，加入可与蛋白质巯基快速反应的固相烷基化试剂，该试剂可选择性与蛋白质上的巯基反应，离心后，反复清洗固相颗粒表面去除其它干扰小分子，即杂质(如糖、盐、表面活性剂、脂类等)，获得高纯度的蛋白质，最后加入蛋白酶将海洋微生物蛋白质酶解成肽段后，离心后获得的产物经简单处理后可直接采用液相色谱‑质谱系统进行分析。该方法特别适合细胞壁较厚破壁困难，脂质等小分子干扰严重的海洋单一、混合微生物以及实际站位海洋宏蛋白质组样品的预处理。
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公开(公告)号：CN113000038A
公开(公告)日：2021-06-22
申请号：CN201911226414.5
申请日：2019-12-04
申请人： 中国科学院大连化学物理研究所
IPC分类号： B01J20/281 , B01J20/28 , B01J20/30 , G01N1/34 , G01N27/62
摘要： 本发明涉及一种利用外泌体富集材料实现生物样品溶液中外泌体的富集方法。所述的针对外泌体富集的材料是利用相反转技术制备而成的表面多孔结构聚合物微球材料。材料可利用表面孔径筛分原理实现外泌体的有效拦截及其通过内部吸附材料实现蛋白质等干扰物质的去除，可应用于血浆，尿液，细胞培养液等中的外泌体的富集。
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公开(公告)号：CN112903403A
公开(公告)日：2021-06-04
申请号：CN201911226412.6
申请日：2019-12-04
申请人： 中国科学院大连化学物理研究所
摘要： 本发明涉及一种利用滤膜实现外泌体富集的装置及其应用，是一种可高通量，快速对体液中外泌体进行富集的装置。本发明的特点是利用抽滤原理选择与外泌体尺寸匹配的孔径的滤膜实现体液中外泌体的富集及其干扰成分的去除。该装置操作简单，处理通量大，可控制抽滤速度，可实现外泌体的快速富集。该装置可应用于血浆，尿液，细胞培养液等中的外泌体的获取。
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公开(公告)号：CN111220429A
公开(公告)日：2020-06-02
申请号：CN201811406709.6
申请日：2018-11-23
申请人： 中国科学院大连化学物理研究所
摘要： 本发明涉及一种阵列高通量蛋白质样品预处理装置，是一种可对多个蛋白质样品同时进行在线变性和还原、除盐以及酶解的样品处理系统，包括：蛋白质处理模块，电源模块，加热控制模块，泵及泵控制模块。本发明的特点是在单路蛋白质预处理仪的基础上,增加到八路同时处理,把单路装置的每个操作模块,在电路、控制及液体流路都分别重新做了优化设计，用最优的方式把各个模块集成到一个操作装置中同时控制八路操作。该装置操作简单,控制精确可靠,样品处理量大,可满足大批量样品的检测要求。
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公开(公告)号：CN103884807A
公开(公告)日：2014-06-25
申请号：CN201210554634.2
申请日：2012-12-19
申请人： 中国科学院大连化学物理研究所
IPC分类号： G01N30/88
摘要： 本发明涉及一种18O在线标记的蛋白质定量分析平台及其操作方法。18O在线标记的蛋白质定量分析平台是一种集蛋白质在线酶解，18O在线标记，多肽分离、检测于一体的系统，包括：注射泵，进样针，柱温箱，酶反应器，切换阀，肽段捕集柱，液相色谱泵，多肽分离柱以及质谱检测器。蛋白样品首先通过注射泵上样到酶反应器中进行孵育，在酶解的同时进行18O标记，酶解完成后18O标记的肽段经捕集柱在线富集后，转入多肽分离柱进行进一步的分离，最后通过质谱检测器进行检测。本发明的优点是将蛋白酶解、18O标记、多肽分离集成化。
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公开(公告)号：CN118209647A
公开(公告)日：2024-06-18
申请号：CN202211626007.5
申请日：2022-12-15
申请人： 中国科学院大连化学物理研究所
摘要： 本发明涉及一种单细胞蛋白质组的集成化在线分析平台及应用，通过结合碘乙酸功能化的毛细管微反应器、微反应器在线上样装置以及自动化液相色谱‑质谱(LC‑MS)系统，以实现单细胞蛋白质组样品制备与LC‑MS分析的集成化。微反应器在线分析平台包括十通阀、上样泵、用于梯度洗脱的液相色谱泵以及用于样品富集和除盐的SPE柱。本发明的优点是单细胞蛋白质组样品制备与LC‑MS分析的集成化，通过结合原位样品处理的毛细管微反应器和微反应器在线上样装置，避免传统离线分析过程中的多步转移，实现高回收率的样品处理、无损在线上样以及高灵敏的单细胞蛋白质组分析。该集成化在线分析平台在单细胞蛋白质组研究领域具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN115487784B
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202110670403.7
申请日：2021-06-17
申请人： 中国科学院大连化学物理研究所
摘要： 本发明涉及一种利用富集材料实现生物样品溶液中细胞外囊泡富集和浓缩的方法。所述的富集材料是由具备超吸附功能的聚合物材料作为内核及具有尺寸筛分功能的多孔结构的透析袋作为外壳组合而成。细胞外囊泡可通过透析袋表面的孔径实现成功的拦截，与其共存的干扰物如蛋白质由于尺寸较小可以成功通过透析袋表面被内部的聚合物材料不可逆的吸附，从而实现干扰物质的成功去除，同时由于聚合物材料的强吸水特性可实现大体积样品的浓缩。此种方式可应用于细胞培养液，尿液，血浆等中的细胞外囊泡的富集。
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公开(公告)号：CN115479812A
公开(公告)日：2022-12-16
申请号：CN202110664500.5
申请日：2021-06-16
申请人： 中国科学院大连化学物理研究所
摘要： 本发明涉及一种自动化蛋白质组样品处理方法，是一种集蛋白质提取、干扰小分子化合物去除和蛋白质酶解的自动化处理方法，包括：蛋白质样品首先通过液体工作站加入至孔板中，然后入蛋白质还原剂和IAA‑MNPs，在高温条件下快速实现蛋白质提取。并通过磁场将材料固定在96孔板的管底或侧壁。将上清溶液移出孔板，加入甲醇和低浓度缓冲溶液分别清洗以去除干扰小分子，最后加入蛋白酶在37℃下进行振荡酶解，通过磁场将材料和上清分离，收集上清中的酶解产物进行液相色谱‑质谱分析。这种方法可以省去传统自由溶液处理方法存在干扰物去除步骤复杂，回收率低、样品处理时间长等问题，显著提高蛋白质组样品处理的效率和通量。
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