生产次丹参酮二烯的酿酒酵母基因工程菌及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN103820344B

    公开(公告)日:2016-12-14

    申请号:CN201110453388.7

    申请日:2011-12-30

    摘要: 本发明公开了生产次丹参酮二烯的酿酒酵母基因工程菌及其构建方法与应用。本发明所提供的基因工程菌是按照包括以下步骤的方法构建的:在出发酿酒酵母中引入外源的丹参柯巴基焦磷酸合酶基因(SmCPS)和丹参次丹参酮二烯合酶基因(SmKSL)得到生产次丹参酮二烯的重组酿酒酵母,记作重组酿酒酵母ZD-T-000和ZD-T-010。在此基础上,提高3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶、萜类调控因子蛋白UPC2、牻牛儿牻牛儿基焦磷酸合酶、法呢基焦磷酸合酶中的一种或几种蛋白的活性,构建得到24株(ZD-T-001~ZD-T-008,ZD-T-011~ZD-T-018,ZD-T-021~ZD-T-028)高产次丹参酮二烯的重组酿酒酵母菌株。本发明所构建的酿酒酵母ZD-Tans-001在好养氧条件下,发酵6天时可生产487.91mg/L的次丹参酮二烯。

    产玫瑰精油的重组酿酒酵母及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN115322913B

    公开(公告)日:2024-03-22

    申请号:CN202110508671.9

    申请日:2021-05-10

    IPC分类号: C12N1/19 C12P7/04 C12R1/865

    摘要: 本发明公开了重组酿酒酵母及其构建方法和应用。该构建方法包括对出发酿酒酵母进行如下改造,得到重组酿酒酵母:A1、导入香叶醇合成酶基因ObGES基因;A2、导入法尼基焦磷酸合成酶基因96位和127位双点突变基因ERG20F96W/N127W基因;A3、导入3‑羟基‑3‑甲基戊二酰辅酶A还原酶基因tHMG1基因;A4、导入香叶醇还原酶基因OYE2基因;A5、导入橙花醇合成酶GmNES基因;A6、导入橙花基二磷酸合成酶SINDPS1基因。该构建方法通过异源表达、模块整合和分支截流调控法尼基焦磷酸合成酶,成功在酿酒酵母中实现了玫瑰精油微生物细胞工厂的构建。

    一种分泌型糖蛋白及其在甾体激素细胞工厂中的应用

    公开(公告)号:CN116445517A

    公开(公告)日:2023-07-18

    申请号:CN202210012914.4

    申请日:2022-01-06

    摘要: 本发明公开了一种分泌型糖蛋白及其在甾体激素细胞工厂中的应用。本发明提供了一种重组菌,为在含有薯蓣皂素合成路径相关基因的底盘酵母菌中进行如下1)或1)和2)的改造,得到的重组菌:1)调控所述底盘酿酒酵母中甾醇‑C24位甲基转移酶ERG6基因的表达;2)提高所述底盘酿酒酵母中脂结合蛋白PRY1基因的表达或该基因编码蛋白的含量;所述含有薯蓣皂素合成路径相关基因的底盘酵母菌为在YSBYT30中过表达StDWF5、GgDHCR24、DGCYP90G、VcCYP94N,SvvCPR以及VcCYP90B27得到的重组菌。本发明发现了一种CAP/SCP蛋白超家族成员蛋白PRY1可以将异源合成的、疏水性较强的、大量积累于细胞膜上甾体激素分泌至细胞外部,缓解细胞工厂的代谢压力。

    Pn3-32-i5蛋白及其编码基因在生产三七皂苷R1中的应用

    公开(公告)号:CN112852763A

    公开(公告)日:2021-05-28

    申请号:CN202010095703.2

    申请日:2020-02-17

    摘要: 本发明公开了Pn3‑32‑i5蛋白及其编码基因在生产三七皂苷R1中的应用。Pn3‑32‑i5蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示。本发明通过将磷酸葡萄糖变位酶1的编码基因、α‑磷酸葡萄糖变位酶的编码基因、尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶的编码基因、拟南芥UDP‑葡萄糖脱氢酶1的编码基因、拟南芥UDP‑葡萄糖醛酸脱羧酶3的编码基因、人参UDP‑糖基转移酶101的编码基因和Pn3‑32‑i5基因导入BY‑PPD‑PPT,得到重组酵母菌Rg1‑XM+Pn3‑32‑i5。重组酵母菌Rg1‑XM+Pn3‑3‑i5可以同时生产三七皂苷R1和人参皂苷Rg1,具有较好的工业化应用前景。本发明具有重要的应用价值。