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公开(公告)号：CN119020415A
公开(公告)日：2024-11-26
申请号：CN202310586227.8
申请日：2023-05-23
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
IPC: C12N15/867 , C12N5/10 , C12N5/077
Abstract: 本发明涉及细胞工程技术领域，公开了一种诱导家犬皮肤成纤维向多能干细胞转化的方法。该方法包括以下步骤：家犬皮肤成纤维细胞的分离培养，确定成纤维细胞无支原体感染后，慢病毒制备及pLentG‑KOSM滴度测定，慢病毒感染后使用多能干细胞诱导培养液进行培养得到诱导多能干细胞。本发明首次利用pLentG‑KOSM的慢病毒，将成年犬皮肤成纤维细胞重编程为犬多能干细胞，大大提高了培养效率，具有胚胎干细胞特性，具备干细胞的三胚层分化能力，本发明培养的犬多能干细胞还可以诱导为神经祖细胞。本方法重编程效率达到0.012％，较现有技术中的利用犬皮肤成纤维细胞重编程的效率0.0007％提高了近15倍。
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公开(公告)号：CN112080464A
公开(公告)日：2020-12-15
申请号：CN202010976166.2
申请日：2020-09-16
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所 , 北京中科昆朋生物技术有限公司
IPC: C12N5/0775
Abstract: 本发明提供了一种犬脐带来源的间充质干细胞培养基和培养方法，所述培养基包含以下浓度的组分：10～20v/v％FBS、0.8～1.2mM丙酮酸钠、0.08～0.15mM甘氨酸、0.08～0.15mM L‑丙氨酸、0.08～0.15mM L‑天冬酰胺、0.08～0.15mM L‑天冬氨酸、0.08～0.15mM L‑谷氨酸、0.08～0.15mM L‑脯氨酸、0.08～0.15mM L‑丝氨酸、2～6mM谷氨酰胺。所述方法包括以下步骤：(1)采集新生犬脐带；(2)将步骤(1)获得的脐带进行清洗，剔除脐带动脉及静脉，剪碎；(3)使用消化液进行消化，获得脐带间充质干细胞；(4)使用上述培养基对步骤(3)获得的脐带间充质干细胞进行培养。上述培养方法可获得增殖能力和定向分化能力强的犬间充质干细胞，具有材料易得、操作简单和获得的间充质干细胞纯度高等优点。
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公开(公告)号：CN115927170B
公开(公告)日：2025-02-28
申请号：CN202211288976.4
申请日：2022-10-20
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明属于细胞培养技术领域，具体涉及一种成年番鸭心肌细胞分离和原代培养的方法。本发明培养方法中，成年番鸭的心肌细胞分离、纯化操作步骤简单，细胞贴壁快、存活率高，活性好，细胞培养体系稳定性好，是一种较为理想的成年番鸭原代心肌细胞培养方法，基本可以满足医学、生物学、药学和生命科学各研究领域对番鸭心肌细胞相关实验研究的要求，适宜在一般实验室进行推广应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112080464B
公开(公告)日：2022-05-13
申请号：CN202010976166.2
申请日：2020-09-16
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所 , 北京中科昆朋生物技术有限公司
IPC: C12N5/0775
Abstract: 本发明提供了一种犬脐带来源的间充质干细胞培养基和培养方法，所述培养基包含以下浓度的组分：10～20v/v％FBS、0.8～1.2mM丙酮酸钠、0.08～0.15mM甘氨酸、0.08～0.15mM L‑丙氨酸、0.08～0.15mM L‑天冬酰胺、0.08～0.15mM L‑天冬氨酸、0.08～0.15mM L‑谷氨酸、0.08～0.15mM L‑脯氨酸、0.08～0.15mM L‑丝氨酸、2～6mM谷氨酰胺。所述方法包括以下步骤：(1)采集新生犬脐带；(2)将步骤(1)获得的脐带进行清洗，剔除脐带动脉及静脉，剪碎；(3)使用消化液进行消化，获得脐带间充质干细胞；(4)使用上述培养基对步骤(3)获得的脐带间充质干细胞进行培养。上述培养方法可获得增殖能力和定向分化能力强的犬间充质干细胞，具有材料易得、操作简单和获得的间充质干细胞纯度高等优点。
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公开(公告)号：CN112574946A
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN202011578249.2
申请日：2020-12-28
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
Abstract: 本发明提供了一种原代分离培养土狗多个组织来源的成纤维细胞及其永生化的构建方法，属于细胞培养技术领域。本发明以土狗的心脏组织、肺尖部或腿部肌肉组织为材料经过胰酶和/或胶原酶II的酶解，分离，获得的具有典型的成纤维细胞形态学特征的心肌成纤维细胞、肺成纤维细胞、成肌纤维细胞。将原代分离培养的心肌成纤维细胞、肺成纤维细胞、成肌纤维细胞经SV40T病毒液转染后经过嘌呤霉素筛选培养和传代，得到永生化心肌成纤维细胞、肺成纤维细胞、成肌纤维细胞。与原代培养的细胞相比，永生化构建的细胞增长速度更快、活力显著提高，为犬类在科学研究、疾病研究等方面提供材料基础。
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公开(公告)号：CN119032936A
公开(公告)日：2024-11-29
申请号：CN202411163591.4
申请日：2024-08-23
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
IPC: A01N1/02
Abstract: 本发明涉及细胞工程技术领域，特别是涉及一种组织保存液及其在保持组织内细胞活性中的应用。本发明提供了一种组织保存液，包括以下体积浓度的组分：胎牛血清70％～90％、二甲基亚砜5％～15％和DMEM液体培养基0～15％。本发明通过适宜比例的胎牛血清和二甲基亚砜复配得到的组织保存液，可用于原代细胞的建立，保存后的组织样本分离的原代细胞增殖能力强，可进行传代培养；另外，本发明提供的组织保存液配比简单，可保持保存30天以内的组织内细胞活力，适用于野外环境样本用于原代细胞的分离，为在不同环境下用于原代细胞培养的组织样本保存提供了技术支持。
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公开(公告)号：CN112574946B
公开(公告)日：2023-12-12
申请号：CN202011578249.2
申请日：2020-12-28
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
Abstract: 本发明提供了一种原代分离培养土狗多个组织来源的成纤维细胞及其永生化的构建方法，属于细胞培养技术领域。本发明以土狗的心脏组织、肺尖部或腿部肌肉组织为材料经过胰酶和/或胶原酶II的酶解，分离，获得的具有典型的成纤维细胞形态学特征的心肌成纤维细胞、肺成纤维细胞、成肌纤维细胞。将原代分离培养的心肌成纤维细胞、肺成纤维细胞、成肌纤维细胞经SV40T病毒液转染后经过嘌呤霉素筛选培养和传代，得到永生化心肌成纤维细胞、肺成纤维细胞、成肌纤维细胞。与原代培养的细胞相比，永生化构建的细胞增长速度更快、活力显著提高，为犬类在科学研究、疾病研究等方面提供材料基础。
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公开(公告)号：CN115927170A
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202211288976.4
申请日：2022-10-20
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明属于细胞培养技术领域，具体涉及一种成年番鸭心肌细胞分离和原代培养的方法。本发明培养方法中，成年番鸭的心肌细胞分离、纯化操作步骤简单，细胞贴壁快、存活率高，活性好，细胞培养体系稳定性好，是一种较为理想的成年番鸭原代心肌细胞培养方法，基本可以满足医学、生物学、药学和生命科学各研究领域对番鸭心肌细胞相关实验研究的要求，适宜在一般实验室进行推广应用。
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