一种原代分离培养土狗多个组织来源的成纤维细胞及其永生化的构建方法

    公开(公告)号:CN112574946B

    公开(公告)日:2023-12-12

    申请号:CN202011578249.2

    申请日:2020-12-28

    Abstract: 本发明提供了一种原代分离培养土狗多个组织来源的成纤维细胞及其永生化的构建方法,属于细胞培养技术领域。本发明以土狗的心脏组织、肺尖部或腿部肌肉组织为材料经过胰酶和/或胶原酶II的酶解,分离,获得的具有典型的成纤维细胞形态学特征的心肌成纤维细胞、肺成纤维细胞、成肌纤维细胞。将原代分离培养的心肌成纤维细胞、肺成纤维细胞、成肌纤维细胞经SV40T病毒液转染后经过嘌呤霉素筛选培养和传代,得到永生化心肌成纤维细胞、肺成纤维细胞、成肌纤维细胞。与原代培养的细胞相比,永生化构建的细胞增长速度更快、活力显著提高,为犬类在科学研究、疾病研究等方面提供材料基础。

    一种构建撒坝猪鉴定SNP位点集的方法及其应用

    公开(公告)号:CN119380808A

    公开(公告)日:2025-01-28

    申请号:CN202411295955.4

    申请日:2024-09-14

    Abstract: 本发明涉及一种构建撒坝猪鉴定SNP位点集的方法及其应用,包括如下步骤:S1、计算撒坝猪的SNP位点品种得分信息;S2、从上述SNP位点中选取撒坝猪SNP位点,使用K‑means聚类方法分为三个聚类簇;S3、对三个聚类簇的SNP位点进一步选取获得撒坝猪鉴定SNP位点集候选位点排序;S4、候选位点选取前30‑40个位点作为撒坝猪的鉴定SNP位点集。本发明提供的构建撒坝猪鉴定SNP位点集的方法及其应用,可从多个猪品系中快速鉴定撒坝猪,或者从多个待测肉制品中快速鉴定撒坝猪肉,鉴定的理论准确度高达99.21%。本发明具有明显的撒坝猪种属特异性,实用性较强,具备良好的开发和应用前景。

    检测基因型的RNA环化效率的方法

    公开(公告)号:CN112301109B

    公开(公告)日:2024-02-13

    申请号:CN201910690857.3

    申请日:2019-07-29

    Abstract: 本发明涉及一种检测基因型的RNA环化效率的方法,主要包括如下的步骤:1)根据环状RNA与线性RNA在结构上的不同,分别设计所述环状RNA的上、下游引物与所述线性RNA的上、下游引物,以区分所述线性RNA和所述环状RNA;2)根据所述基因型所对应的基因型位点设计探针;3)使用步骤1)和2)中所获得的所述上、下游引物和所述探针,通过ddPCR仪对待测cDNA样品分别进行所述线性RNA和所述环状RNA的绝对定量检测,得到所述基因型的环状RNA序列拷贝数和所述基因型的线性RNA序列拷贝数;4)根据公式计算所述基因型的RNA环化效率。该方法成本低、结果分析时间短、操作简单,检测数据准确,不需要对现有的仪器和试剂进行改造。

    一种原代分离培养土狗多个组织来源的成纤维细胞及其永生化的构建方法

    公开(公告)号:CN112574946A

    公开(公告)日:2021-03-30

    申请号:CN202011578249.2

    申请日:2020-12-28

    Abstract: 本发明提供了一种原代分离培养土狗多个组织来源的成纤维细胞及其永生化的构建方法,属于细胞培养技术领域。本发明以土狗的心脏组织、肺尖部或腿部肌肉组织为材料经过胰酶和/或胶原酶II的酶解,分离,获得的具有典型的成纤维细胞形态学特征的心肌成纤维细胞、肺成纤维细胞、成肌纤维细胞。将原代分离培养的心肌成纤维细胞、肺成纤维细胞、成肌纤维细胞经SV40T病毒液转染后经过嘌呤霉素筛选培养和传代,得到永生化心肌成纤维细胞、肺成纤维细胞、成肌纤维细胞。与原代培养的细胞相比,永生化构建的细胞增长速度更快、活力显著提高,为犬类在科学研究、疾病研究等方面提供材料基础。

    中国家猪与西方商品猪资源鉴定位点及其位点扩增引物

    公开(公告)号:CN103789411B

    公开(公告)日:2015-12-30

    申请号:CN201310723082.8

    申请日:2013-12-25

    Abstract: 本发明提供一种中国家猪与西方商品猪资源鉴定位点及其位点扩增引物,属于生物技术领域。本发明的11个鉴定位点的坐标如下:chr4_90338649、chr6_46031147、chr3_40173091、chr1_304503930、chr8_55949794、chr4_51135766、chr14_51320355、chr6_261199、chr1_82559795、chr15_101338073、chr4_81507260,11个鉴定位点中国家猪的优势等位基因分别是G、T、A、T、A、C、A、C、A、T、G。用于中国家猪与西方商品猪资源鉴定位点扩增的引物如表1所示。本发明的有益效果在于:筛选中国家猪遗传组分中特有的单核苷酸标记位点,通过现代分子生物学技术检测分子标记位点的基因型,用于有效地鉴定并区分中国家猪品种与西方商品猪血缘。为中国家猪的育种及种质资源保护过程中种质的鉴定提供准确指导。

    检测基因型的RNA环化效率的方法

    公开(公告)号:CN112301109A

    公开(公告)日:2021-02-02

    申请号:CN201910690857.3

    申请日:2019-07-29

    Abstract: 本发明涉及一种检测基因型的RNA环化效率的方法,主要包括如下的步骤:1)根据环状RNA与线性RNA在结构上的不同,分别设计所述环状RNA的上、下游引物与所述线性RNA的上、下游引物,以区分所述线性RNA和所述环状RNA;2)根据所述基因型所对应的基因型位点设计探针;3)使用步骤1)和2)中所获得的所述上、下游引物和所述探针,通过ddPCR仪对待测cDNA样品分别进行所述线性RNA和所述环状RNA的绝对定量检测,得到所述基因型的环状RNA序列拷贝数和所述基因型的线性RNA序列拷贝数;4)根据公式计算所述基因型的RNA环化效率。该方法成本低、结果分析时间短、操作简单,检测数据准确,不需要对现有的仪器和试剂进行改造。

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