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公开(公告)号：CN103805634B
公开(公告)日：2015-09-30
申请号：CN201410077204.5
申请日：2014-03-05
申请人： 中国科学院武汉病毒研究所
摘要： 本发明公开了一种带有绿色荧光蛋白基因的CA16感染性克隆及构建方法和应用。以低拷贝质粒pACYC177为载体，首先插入CA16/GD09/24病毒株的全长cDNA；然后以此全长感染性克隆为骨架，在5’UTR和VP4间插入eGFP报告基因并添加2A蛋白酶切割位点(AITTL)，从而获得带有eGFP报告基因的CA16全长感染性克隆。本发明所构建的带有绿色荧光蛋白基因的CA16感染性克隆可以拯救出具有与重组CA16病毒及亲本CA16生长趋势相似的eGFP-CA16报告病毒，并可以用于抗病毒药物筛选，为深入开展病毒复制与致病机理研究提供了便捷的平台，为今后筛选和开发新型疫苗奠定了坚实的基础。
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公开(公告)号：CN103497972A
公开(公告)日：2014-01-08
申请号：CN201310441707.1
申请日：2013-09-25
申请人： 中国科学院武汉病毒研究所
摘要： 本发明公开了一种带有荧光素酶基因的JEV感染性克隆及构建方法和应用。一种带有荧光素酶基因的JEV感染性克隆，其制备步骤是：（1）JEV病毒SA14株基因序列的分段合成；（2）JEV病毒感染性克隆的组装与构建；（3）带有荧光素酶基因的JEV感染性克隆的构建。本发明通过免疫荧光、Rluc活性的检测、病毒噬斑、药物抑制、活体动物成像及疫苗评价等实验证明：本发明所构建的带有荧光素酶基因的JEV感染性克隆可以拯救出具有与JEV病毒生长趋势相同的Rluc-JEV报告病毒，并且在动物模型、病毒复制与致病机理、药物筛选和药物作用机制、活体动物成像及疫苗评价等方面具有广泛的应用价值。
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公开(公告)号：CN113699184A
公开(公告)日：2021-11-26
申请号：CN202111054483.X
申请日：2021-09-09
申请人： 中国科学院武汉病毒研究所
摘要： 本发明属于动物疫苗技术领域，具体涉及一种适用于表达抗体的VEEV表达载体及应用。本发明以该mRNA以缺失结构蛋白基因的委内瑞拉马脑炎病毒疫苗株TC‑83复制子为载体，通过插入第二个SG启动子，使用2个SG启动子分别表达抗体的重链和轻链，可实现使用1个mRNA表达1个完整抗体。并且该mRNA可通过与helper RNAs（缺失nsP4的VEEV‑C和VEEV‑E）共转染包装得到表达抗体的VRP，该VRP可通过滴鼻给药肺部靶向递送，并有效表达，从而对小鼠提供有效的保护作用。
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公开(公告)号：CN103497972B
公开(公告)日：2015-09-30
申请号：CN201310441707.1
申请日：2013-09-25
申请人： 中国科学院武汉病毒研究所
摘要： 本发明公开了一种带有荧光素酶基因的JEV感染性克隆及构建方法和应用。一种带有荧光素酶基因的JEV感染性克隆，其制备步骤是：（1）JEV病毒SA14株基因序列的分段合成；（2）JEV病毒感染性克隆的组装与构建；（3）带有荧光素酶基因的JEV感染性克隆的构建。本发明通过免疫荧光、Rluc活性的检测、病毒噬斑、药物抑制、活体动物成像及疫苗评价等实验证明：本发明所构建的带有荧光素酶基因的JEV感染性克隆可以拯救出具有与JEV病毒生长趋势相同的Rluc-JEV报告病毒，并且在动物模型、病毒复制与致病机理、药物筛选和药物作用机制、活体动物成像及疫苗评价等方面具有广泛的应用价值。
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公开(公告)号：CN103805634A
公开(公告)日：2014-05-21
申请号：CN201410077204.5
申请日：2014-03-05
申请人： 中国科学院武汉病毒研究所
摘要： 本发明公开了一种带有绿色荧光蛋白基因的CA16感染性克隆及构建方法和应用。以低拷贝质粒pACYC177为载体，首先插入CA16/GD09/24病毒株的全长cDNA；然后以此全长感染性克隆为骨架，在5’UTR和VP4间插入eGFP报告基因并添加2A蛋白酶切割位点(AITTL)，从而获得带有eGFP报告基因的CA16全长感染性克隆。本发明所构建的带有绿色荧光蛋白基因的CA16感染性克隆可以拯救出具有与重组CA16病毒及亲本CA16生长趋势相似的eGFP-CA16报告病毒，并可以用于抗病毒药物筛选，为深入开展病毒复制与致病机理研究提供了便捷的平台，为今后筛选和开发新型疫苗奠定了坚实的基础。
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