专利检索 ap:("中国科学院水生生物研究所") AND inv:"蒋芳芳" 第 1 页

1.

发明公开
用于制备真核表达构建体的前T载体及其制备方法和应用无效

公开(公告)号：CN101629183A

公开(公告)日：2010-01-20

申请号：CN200910063275.9

申请日：2009-07-21

申请人： 中国科学院水生生物研究所

发明人： 刘庭凯 , 桂建芳 , 张义兵 , 蒋芳芳

IPC分类号： C12N15/79

摘要： 本发明公开了一种用于制备真核表达构建体的前T载体及其制备方法和应用，涉及T载体制备技术领域。本前T载体是在现有的质粒型真核表达载体中引入Kozak序列和XcmI盒或AhdI盒，再利用XcmI酶切或AhdI酶切，形成T载体，再利用该T载体可以直接克隆PCR产物。本前T载体的制备方法是：①制备含有Kozak序列和XcmI盒的真核表达载体通用插入序列；②制备真核表达前T载体。本发明的前T载体是以质粒形式存在，可以通过细菌扩增而源源不断地获得；可用于直接克隆PCR产物，简化了对PCR产物和载体进行双酶切的过程；使得引物设计更加简便；可以提高外源蛋白的表达效率；适用于用TA克隆的方法快速制备各种真核表达构建体。