一种Vc二步发酵菌株的筛选方法

    公开(公告)号:CN102978131A

    公开(公告)日:2013-03-20

    申请号:CN201210453520.9

    申请日:2012-11-13

    摘要: 本发明涉及菌株筛选方法,具体的说是一种Vc二步发酵菌株的筛选方法。将Vc二步发酵中的转化菌和伴生菌混合培养于Vc二步发酵的种子液中,发酵液经离心后,上清液为转化菌溶液A;另将Vc二步发酵中的伴生菌接种于培养基中培养20-28小时,培养后无菌滤膜过滤滤液为发酵液B;将转化菌溶液A与发酵液B混匀后进行稀释,取稀释液涂布于分离培养基上,在29-37℃培养4-8天后,形成转化菌的菌落;再在形成转化菌的菌落的分离培养基上加入0.1%浓度的无菌溴百里香酚兰指示液,于常温下静置0.5~2小时,根据菌落周围的黄色圈大小判断转化效率高低,从而快速筛选出具高效转化能力的转化菌株。本发明筛选方法既避免了伴生菌的存在对转化作用的影响,又保证了伴生液对转化菌生长和产酸的激活作用,而指示剂颜色的变化又能准确指示转化菌的转化能力,同时极大地提高了筛选效率。

    一种通过伴生菌数量的适应调节来制备2-酮基-L-古龙酸的方法

    公开(公告)号:CN103509846B

    公开(公告)日:2015-07-22

    申请号:CN201310521113.1

    申请日:2013-10-25

    摘要: 一种应用于Vc二步发酵领域中的通过伴生菌数量的适应调节来制备2-酮基-L-古龙酸的方法,所述方法是,调整种子培养基山梨糖浓度至4-7%质量体积比,发酵20-30小时,伴生菌营养体浓度回落,终止发酵,所述种子培养基山梨糖浓度为4%-5%质量体积比;所述种子培养基的发酵时间为24-26小时;所述待产酸菌浓度达3×109cfu/ml,伴生菌营养体浓度回落至1×107cfu/ml时,终止发酵;所述新增补的葡萄糖的含量为0.05%质量体积比,酵母膏的含量为0.02%质量体积比;所述的接种量为10%体积比。该发明发酵周期短、提升发酵水平,缩短发酵周期、提高发酵转化、使其生长和代谢维持一相对平稳水准,延长活性蛋白供应时段,实现发酵的高效运转。

    一种通过伴生菌数量的适应调节来制备2-酮基-L-古龙酸的方法

    公开(公告)号:CN103509846A

    公开(公告)日:2014-01-15

    申请号:CN201310521113.1

    申请日:2013-10-25

    摘要: 一种应用于Vc二步发酵领域中的通过伴生菌数量的适应调节来制备2-酮基-L-古龙酸的方法,所述方法是,调整种子培养基山梨糖浓度至4-7%质量体积比,发酵20-30小时,伴生菌营养体浓度回落,终止发酵,所述种子培养基山梨糖浓度为4%-5%质量体积比;所述种子培养基的发酵时间为24-26小时;所述待产酸菌浓度达3×109cfu/ml,伴生菌营养体浓度回落至1×107cfu/ml时,终止发酵;所述新增补的葡萄糖的含量为0.05%质量体积比,酵母膏的含量为0.02%质量体积比;所述的接种量为10%体积比。该发明发酵周期短、提升发酵水平,缩短发酵周期、提高发酵转化、使其生长和代谢维持一相对平稳水准,延长活性蛋白供应时段,实现发酵的高效运转。