-
公开(公告)号:CN102181504A
公开(公告)日:2011-09-14
申请号:CN201110062433.6
申请日:2011-03-15
申请人: 中国科学院沈阳应用生态研究所 , 东北制药集团股份有限公司
IPC分类号: C12P17/04 , C12P39/00 , C12R1/11 , C12R1/10 , C12R1/085 , C12R1/07 , C12R1/72 , C12R1/865 , C12R1/645
摘要: 本发明涉及维生素C第二步发酵领域,具体为一种伴生菌活性胞外液制剂在Vc二步发酵中的应用。(1)选Vc二步发酵伴生菌接入牛肉膏蛋白胨培养基等中,33℃震荡培养至生长稳定期,收集发酵醪液,以0.45μm滤膜过滤弃菌体,滤液再用截留分子量3-5万道尔顿的超滤膜超滤浓缩至蛋白含量为10-20mg/ml,制成伴生菌活性胞外液制剂,无菌分装、低温保藏;(2)在Vc二步发酵中,当发酵进入中期和/或后期时,分别向发酵罐注入活性胞外液制剂10-12L/100M3,同时补加山梨糖水溶液至山梨糖终浓度达10-11wt%。本发明可解决现有技术中发酵过程可控性差、发酵水平高低波动过大、生产不稳定、严重影响生产效率等问题。
-
公开(公告)号:CN103074406B
公开(公告)日:2014-07-23
申请号:CN201110329992.9
申请日:2011-10-26
申请人: 中国科学院沈阳应用生态研究所 , 东北制药集团股份有限公司
摘要: 本发明涉及维生素C的两步发酵领域,具体为一种古龙酸的高温发酵的方法。生产维生素C前提古龙酸的发酵过程中,发酵底物为浓度为8-9%的山梨糖,种液接种量为5-15%,发酵起始,温度控制在29-31℃,pH6.7-6.9,通风溶氧百分比为20-22%;待发酵菌浓度达1-10×108个/ml,开始逐步升温至42-50℃,同时增加通风至醪液溶氧百分比达25%,待发酵至40小时后调pH为7.2-7.4,并且降低溶氧百比分比至15%,至发酵结束,实现古龙酸的高温发酵。本发明古龙酸的高温发酵,发酵速度加快,发酵周期缩短15-20%,设备利用率提高10-15%。
-
公开(公告)号:CN103074406A
公开(公告)日:2013-05-01
申请号:CN201110329992.9
申请日:2011-10-26
申请人: 中国科学院沈阳应用生态研究所 , 东北制药集团股份有限公司
摘要: 本发明涉及维生素C的两步发酵领域,具体为一种古龙酸的高温发酵的方法。生产维生素C前提古龙酸的发酵过程中,发酵底物为浓度为8-9%的山梨糖,种液接种量为5-15%,发酵起始,温度控制在29-31℃,pH6.7-6.9,通风溶氧百分比为20-22%;待发酵菌浓度达1-10×108个/ml,开始逐步升温至42-50℃,同时增加通风至醪液溶氧百分比达25%,待发酵至40小时后调pH为7.2-7.4,并且降低溶氧百比分比至15%,至发酵结束,实现古龙酸的高温发酵。本发明古龙酸的高温发酵,发酵速度加快,发酵周期缩短15-20%,设备利用率提高10-15%。
-
公开(公告)号:CN102978273B
公开(公告)日:2014-01-08
申请号:CN201210453539.3
申请日:2012-11-13
申请人: 中国科学院沈阳应用生态研究所
摘要: 本发明属于维生素C生物发酵技术领域,具体的说是Vc第二步生物发酵中一种利用混合菌生物发酵转化山梨糖为2-酮基-L-古龙酸的方法。Vc二步发酵生产工艺的种子液逐级扩大,发酵培养时将A菌系和B菌系的种子液,以体积百分比15-20%的总接种量接入发酵罐中发酵培养至发酵终点(即至发酵液中残余山梨糖浓度≤1mg/ml),实现利用混合菌发酵转化山梨糖为2-酮基-L-古龙酸;其中A菌系由伴生菌蜡样芽孢杆菌/伴生菌巨大芽孢杆菌与产酸菌生酮基古龙酸菌组成;B菌系由伴生菌苏云金芽孢杆菌和产酸菌生酮基古龙酸菌组成;采用本发明的三菌混合发酵新方法,发挥了两种伴生菌的各自优势,可缩短发酵周期6-8小时,降低能耗10-15%,提高发酵转化率2-4%。
-
公开(公告)号:CN102978131A
公开(公告)日:2013-03-20
申请号:CN201210453520.9
申请日:2012-11-13
申请人: 中国科学院沈阳应用生态研究所
摘要: 本发明涉及菌株筛选方法,具体的说是一种Vc二步发酵菌株的筛选方法。将Vc二步发酵中的转化菌和伴生菌混合培养于Vc二步发酵的种子液中,发酵液经离心后,上清液为转化菌溶液A;另将Vc二步发酵中的伴生菌接种于培养基中培养20-28小时,培养后无菌滤膜过滤滤液为发酵液B;将转化菌溶液A与发酵液B混匀后进行稀释,取稀释液涂布于分离培养基上,在29-37℃培养4-8天后,形成转化菌的菌落;再在形成转化菌的菌落的分离培养基上加入0.1%浓度的无菌溴百里香酚兰指示液,于常温下静置0.5~2小时,根据菌落周围的黄色圈大小判断转化效率高低,从而快速筛选出具高效转化能力的转化菌株。本发明筛选方法既避免了伴生菌的存在对转化作用的影响,又保证了伴生液对转化菌生长和产酸的激活作用,而指示剂颜色的变化又能准确指示转化菌的转化能力,同时极大地提高了筛选效率。
-
公开(公告)号:CN111073946A
公开(公告)日:2020-04-28
申请号:CN201911333031.8
申请日:2019-12-23
申请人: 中国科学院沈阳应用生态研究所
摘要: 本发明涉及微生物发酵技术领域,具体为Vc二步发酵的营养优化方法。在Vc二步发酵液体培养基中加入非植物性氮源;其添加量为液体培养基总体积的0.2~0.5%(w/v)。本发明通过调整液体培养基组成,在其内补加适量非植物性氮源,促进混菌细胞的生长和代谢,提高2-酮基-L-古龙酸的合成效率,使转化速率提高15~20%,发酵周期缩短10~20%。
-
公开(公告)号:CN102978273A
公开(公告)日:2013-03-20
申请号:CN201210453539.3
申请日:2012-11-13
申请人: 中国科学院沈阳应用生态研究所
摘要: 本发明属于维生素C生物发酵技术领域,具体的说是Vc第二步生物发酵中一种利用混合菌生物发酵转化山梨糖为2-酮基-L-古龙酸的方法。Vc二步发酵生产工艺的种子液逐级扩大,发酵培养时将A菌系和B菌系的种子液,以体积百分比15-20%的总接种量接入发酵罐中发酵培养至发酵终点(即至发酵液中残余山梨糖浓度≤1mg/ml),实现利用混合菌发酵转化山梨糖为2-酮基-L-古龙酸;其中A菌系由伴生菌蜡样芽孢杆菌/伴生菌巨大芽孢杆菌与产酸菌生酮基古龙酸菌组成;B菌系由伴生菌苏云金芽孢杆菌和产酸菌生酮基古龙酸菌组成;采用本发明的三菌混合发酵新方法,发挥了两种伴生菌的各自优势,可缩短发酵周期6-8小时,降低能耗10-15%,提高发酵转化率2-4%。
-
公开(公告)号:CN103509846B
公开(公告)日:2015-07-22
申请号:CN201310521113.1
申请日:2013-10-25
申请人: 东北制药集团股份有限公司
摘要: 一种应用于Vc二步发酵领域中的通过伴生菌数量的适应调节来制备2-酮基-L-古龙酸的方法,所述方法是,调整种子培养基山梨糖浓度至4-7%质量体积比,发酵20-30小时,伴生菌营养体浓度回落,终止发酵,所述种子培养基山梨糖浓度为4%-5%质量体积比;所述种子培养基的发酵时间为24-26小时;所述待产酸菌浓度达3×109cfu/ml,伴生菌营养体浓度回落至1×107cfu/ml时,终止发酵;所述新增补的葡萄糖的含量为0.05%质量体积比,酵母膏的含量为0.02%质量体积比;所述的接种量为10%体积比。该发明发酵周期短、提升发酵水平,缩短发酵周期、提高发酵转化、使其生长和代谢维持一相对平稳水准,延长活性蛋白供应时段,实现发酵的高效运转。
-
公开(公告)号:CN103509846A
公开(公告)日:2014-01-15
申请号:CN201310521113.1
申请日:2013-10-25
申请人: 东北制药集团股份有限公司
摘要: 一种应用于Vc二步发酵领域中的通过伴生菌数量的适应调节来制备2-酮基-L-古龙酸的方法,所述方法是,调整种子培养基山梨糖浓度至4-7%质量体积比,发酵20-30小时,伴生菌营养体浓度回落,终止发酵,所述种子培养基山梨糖浓度为4%-5%质量体积比;所述种子培养基的发酵时间为24-26小时;所述待产酸菌浓度达3×109cfu/ml,伴生菌营养体浓度回落至1×107cfu/ml时,终止发酵;所述新增补的葡萄糖的含量为0.05%质量体积比,酵母膏的含量为0.02%质量体积比;所述的接种量为10%体积比。该发明发酵周期短、提升发酵水平,缩短发酵周期、提高发酵转化、使其生长和代谢维持一相对平稳水准,延长活性蛋白供应时段,实现发酵的高效运转。
-
-
-
-
-
-
-
-