公开(公告)号：CN101914149B

公开(公告)日：2013-04-03

申请号：CN201010011496.4

申请日：2010-01-16

申请人： 中国科学院海洋研究所

发明人： 宋林生 ,  张莹 ,  王玲玲 ,  邱丽梅

IPC分类号： C07K14/435

摘要： 本发明涉及中华绒螯蟹抗脂多糖因子(EsALF-2)基因的体外重组表达技术及其功能鉴定。中华绒螯蟹抗脂多糖因子具有序列SEQ ID NO.1中氨基酸序列。本发明利用体外重组表达技术获得了中华绒螯蟹抗脂多糖因子(EsALF-2)，该重组蛋白具有广谱性的抑菌效果，对革兰氏阳性菌枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、革兰氏阴性菌鳗弧菌(Listonella anguillarum)和真菌毕赤酵母(Pichia pastoris)的生长都具有明显的抑制效果，对它们起抑制作用的最小蛋白浓度分别为：150μg mL-1，75μg mL-1和18.75μg mL-1。

公开(公告)号：CN101914149A

公开(公告)日：2010-12-15

申请号：CN201010011496.4

申请日：2010-01-16

申请人： 中国科学院海洋研究所

发明人： 宋林生 ,  张莹 ,  王玲玲 ,  邱丽梅

IPC分类号： C07K14/435 ,  C12N15/12 ,  C12N15/70 ,  A61K38/17 ,  A61P31/04 ,  A61P31/10 ,  A61P37/04 ,  A23L1/29 ,  A23K1/16

摘要： 本发明涉及中华绒螯蟹抗脂多糖因子(EsALF-2)基因的体外重组表达技术及其功能鉴定。中华绒螯蟹抗脂多糖因子具有序列SEQ ID NO.1中氨基酸序列。本发明利用体外重组表达技术获得了中华绒螯蟹抗脂多糖因子(EsALF-2)，该重组蛋白具有广谱性的抑菌效果，对革兰氏阳性菌枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、革兰氏阴性菌鳗弧菌(Listonella anguillarum)和真菌毕赤酵母(Pichia pastoris)的生长都具有明显的抑制效果，对它们起抑制作用的最小蛋白浓度分别为：150μg mL-1，75μg mL-1和18.75μg mL-1。

公开(公告)号：CN102399784B

公开(公告)日：2014-07-02

申请号：CN201010280221.0

申请日：2010-09-10

申请人： 中国科学院海洋研究所

发明人： 邱丽梅 ,  孙瑞 ,  岳峰 ,  张莹 ,  王玲玲 ,  张峘 ,  宋林生

IPC分类号： C12N15/117

摘要： 本发明涉及分子生物学，具体的说是一种对虾、蟹等水产养殖动物有免疫增强活性的CpG寡聚核苷酸及其制备和应用。具有免疫增强活性的CpG寡聚核苷酸具有序列表SEQ？ID？NO.1所示的碱基序列。将富含CpG寡聚核苷酸序列的质粒转化到大肠杆菌DH5α菌株中，随后进行发酵。收集发酵产物，采用异丙醇沉降法进行CpG？ODNs的分离纯化。应用所述序列表SEQ？IDNO.1所示的碱基序列CpG寡聚核苷酸可应用于水产养殖饲料添加剂或免疫增强剂，如每千克饲料中添加10-100mg上述CpG寡聚核苷酸可明显促进养殖动物的生长。本发明利用生物工程发酵的技术和简化的提取方法来大量扩增和提取CpG寡聚核苷酸，比实验室条件下更省时省力，效率也更高，便于工业化推广。

公开(公告)号：CN102399784A

公开(公告)日：2012-04-04

申请号：CN201010280221.0

申请日：2010-09-10

申请人： 中国科学院海洋研究所

发明人： 邱丽梅 ,  孙瑞 ,  岳峰 ,  张莹 ,  王玲玲 ,  张峘 ,  宋林生

IPC分类号： C12N15/117 ,  C12N15/10 ,  A23K1/16

摘要： 本发明涉及分子生物学，具体的说是一种对虾、蟹等水产养殖动物有免疫增强活性的CpG寡聚核苷酸及其制备和应用。具有免疫增强活性的CpG寡聚核苷酸具有序列表SEQ ID NO.1所示的碱基序列。将富含CpG寡聚核苷酸序列的质粒转化到大肠杆菌DH5α菌株中，随后进行发酵。收集发酵产物，采用异丙醇沉降法进行CpG ODNs的分离纯化。应用所述序列表SEQ IDNO.1所示的碱基序列CpG寡聚核苷酸可应用于水产养殖饲料添加剂或免疫增强剂，如每千克饲料中添加10-100mg上述CpG寡聚核苷酸可明显促进养殖动物的生长。本发明利用生物工程发酵的技术和简化的提取方法来大量扩增和提取CpG寡聚核苷酸，比实验室条件下更省时省力，效率也更高，便于工业化推广。