一种抗CP4EPSPS单克隆抗体的制备方法、编码序列及其应用

    公开(公告)号:CN103848916B

    公开(公告)日:2016-08-03

    申请号:CN201210499173.3

    申请日:2012-11-29

    IPC分类号: C07K16/40 G01N33/577

    摘要: 本发明涉及一种针对转基因中常见的抗草甘膦抗性蛋白?5?烯醇丙酮酰?莽草酸?3?磷酸合成酶(5?enolpyruvyl?shikimate?3?phosphate synthase,EPSPS)的单克隆抗体及其制备方法,目的是提供一种新的可以检测天然转基因植物(大豆、玉米、棉花和水稻等)中是否存在CP4 EPSPS蛋白的单克隆抗体。制备该单克隆抗体的专用抗原,是根据已公布的CP4 EPSPS基因序列通过大肠杆菌进行重组表达得到的。该单克隆抗体的亚型为IgG1,亲和常数达到2.35×108。该单克隆抗体能识别转基因植物中的CP4 EPSPS蛋白,可用于转CP4 EPSPS基因植物的检测。本发明还提供了该单克隆抗体的轻链和重链可变区编码序列。

    抗PMI蛋白的单克隆抗体及其应用

    公开(公告)号:CN105330742A

    公开(公告)日:2016-02-17

    申请号:CN201410387508.1

    申请日:2014-08-08

    IPC分类号: C07K16/40 G01N33/577

    摘要: 本发明公开了特异性识别转基因植物中非抗生素类安全筛选标记PMI(磷酸甘露糖异构酶)单克隆抗体及其制备方法,目的是为免疫学方法检测天然转基因物种(玉米、水稻、棉花等)中是否存在筛选标记PMI提供关键试剂材料。磷酸甘露糖异构酶(phosphomannose isomerase,PMI)基因是一种生物安全标记基因。制备该抗体的抗原为由大肠杆菌表达的可溶性全长PMI重组蛋白,最终获得的抗体属于IgG1亚型,编码其可变区的序列经基因克隆的方式获得。对天然转基因水稻材料的Western Blotting检测发现,该抗体具有很好的特异性,可以用于对转基因材料的检测。

    一种新的水稻内参蛋白质及其单克隆抗体的应用

    公开(公告)号:CN102464706A

    公开(公告)日:2012-05-23

    申请号:CN201010531838.5

    申请日:2010-11-04

    摘要: 本发明提供了一种适合水稻免疫印迹研究的内参蛋白质水稻热激90蛋白质,该蛋白质在水稻不同发育时期和不同组织的材料,水稻接白叶枯病菌不同时间的材料和水稻昼夜不同时间的材料中均稳定表达,可以作为水稻免疫印迹研究的内参蛋白质。本发明还提供了水稻热激90蛋白质相应的单克隆抗体,利用体外表达的片段蛋白质作免疫原免疫Balb/c小鼠,得到的杂交瘤XXX分泌得Rice90-31单克隆抗体。该抗体能够特异的识别重组蛋白质和水稻天然蛋白质,在实验中的使用效价是1∶10000-1∶20000;本发明制备的Rice90-31单克隆抗体的线性检测范围是0.41-8.2ng,在水稻蛋白中的最低下限大约是0.24ng;利用标准曲线计算出HSP蛋白质在水稻总蛋白中的百分含量大约是0.12%。