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公开(公告)号：CN109402085B
公开(公告)日：2021-02-12
申请号：CN201810112817.6
申请日：2018-02-05
申请人： 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 , 浙江海正药业股份有限公司
摘要： 本发明属于生物技术和药物技术领域，提供了合成辛伐他汀的重组菌株、方法以及相关的酶，其中，所述重组菌株同时表达2‑甲基丁酸侧链水解酶和酰基转移酶。本发明的辛伐他汀合成方法步骤简化，杂质含量低，反应条件温和。
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公开(公告)号：CN109402222A
公开(公告)日：2019-03-01
申请号：CN201810112820.8
申请日：2018-02-05
申请人： 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 , 浙江海正药业股份有限公司
摘要： 本发明属于蛋白质工程领域，提供一种水解酶的高通量筛选方法，所述方法包括：利用平板显色法对水解酶突变体文库进行初筛，根据菌落的颜色变化筛选得到可能具有水解酶活性的突变体；将初筛得到的突变体经微孔板光谱法进行复筛，得到具有水解酶活性的突变体；将复筛得到的突变体进行摇瓶培养，确定水解酶突变体的活性。本发明的方法普适性强、灵敏度高、简单有效、通量高。
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公开(公告)号：CN108118042B
公开(公告)日：2021-01-15
申请号：CN201611079430.2
申请日：2016-11-30
申请人： 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 , 浙江海正药业股份有限公司
摘要： 本发明属于生物制药技术领域，涉及一种2‑甲基丁酸侧链水解酶和能够合成该水解酶从而生产莫纳可林J的菌株。本发明提供的2‑甲基丁酸侧链水解酶能够有效水解洛伐他汀为莫纳可林J，酶活性高，从而简化了辛伐他汀的生产工艺，降低成本，提高生产效率，减少环境污染。
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公开(公告)号：CN109402085A
公开(公告)日：2019-03-01
申请号：CN201810112817.6
申请日：2018-02-05
申请人： 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 , 浙江海正药业股份有限公司
摘要： 本发明属于生物技术和药物技术领域，提供了合成辛伐他汀的重组菌株、方法以及相关的酶，其中，所述重组菌株同时表达2-甲基丁酸侧链水解酶和酰基转移酶。本发明的辛伐他汀合成方法步骤简化，杂质含量低，反应条件温和。
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公开(公告)号：CN109402222B
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN201810112820.8
申请日：2018-02-05
申请人： 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 , 浙江海正药业股份有限公司
摘要： 本发明属于蛋白质工程领域，提供一种水解酶的高通量筛选方法，所述方法包括：利用平板显色法对水解酶突变体文库进行初筛，根据菌落的颜色变化筛选得到可能具有水解酶活性的突变体；将初筛得到的突变体经微孔板光谱法进行复筛，得到具有水解酶活性的突变体；将复筛得到的突变体进行摇瓶培养，确定水解酶突变体的活性。本发明的方法普适性强、灵敏度高、简单有效、通量高。
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公开(公告)号：CN109402086A
公开(公告)日：2019-03-01
申请号：CN201810114102.4
申请日：2018-02-05
申请人： 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 , 浙江海正药业股份有限公司
摘要： 本发明属于蛋白质工程和医药生产领域，提供一种2-甲基丁酸侧链水解酶，所述酶通过定点突变野生型PcEST得到，突变位点是第140位。本发明还提供与所述酶相关的生物材料，所述酶的应用，以及编码所述酶的曲霉菌株和构建方法。本发明提供的2-甲基丁酸侧链水解酶酶活性高，对温度的稳定性提高，更有利于工业化应用。
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公开(公告)号：CN108118042A
公开(公告)日：2018-06-05
申请号：CN201611079430.2
申请日：2016-11-30
申请人： 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 , 浙江海正药业股份有限公司
摘要： 本发明属于生物制药技术领域，涉及一种2-甲基丁酸侧链水解酶和能够合成该水解酶从而生产莫纳可林J的菌株。本发明提供的2-甲基丁酸侧链水解酶能够有效水解洛伐他汀为莫纳可林J，酶活性高，从而简化了辛伐他汀的生产工艺，降低成本，提高生产效率，减少环境污染。
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公开(公告)号：CN110857441B
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN201810975349.5
申请日：2018-08-24
申请人： 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 , 浙江海正药业股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种产莫纳可林J的曲霉菌及其构建方法与应用。本发明公开的一种产莫纳可林J的曲霉菌的构建方法，包括在曲霉菌中完全阻断聚酮合酶LovF表达的步骤。本发明通过完全敲除lovF基因阻断洛伐他汀合成而实现莫纳可林J的积累，再在此基础上用组成型启动子过表达转录调控因子lovE，使得构建得到的菌株的莫纳可林J产量进一步显著提高，并增强了该菌株的发酵稳定性。可以利用本发明的菌株直接发酵生产莫纳可林J，从而简化辛伐他汀的生产工艺，降低成本，提高生产效率，减少环境污染。
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公开(公告)号：CN109402086B
公开(公告)日：2020-08-11
申请号：CN201810114102.4
申请日：2018-02-05
申请人： 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 , 浙江海正药业股份有限公司
摘要： 本发明属于蛋白质工程和医药生产领域，提供一种2‑甲基丁酸侧链水解酶，所述酶通过定点突变野生型PcEST得到，突变位点是第140位。本发明还提供与所述酶相关的生物材料，所述酶的应用，以及编码所述酶的曲霉菌株和构建方法。本发明提供的2‑甲基丁酸侧链水解酶酶活性高，对温度的稳定性提高，更有利于工业化应用。
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公开(公告)号：CN110857441A
公开(公告)日：2020-03-03
申请号：CN201810975349.5
申请日：2018-08-24
申请人： 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 , 浙江海正药业股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种产莫纳可林J的曲霉菌及其构建方法与应用。本发明公开的一种产莫纳可林J的曲霉菌的构建方法，包括在曲霉菌中完全阻断聚酮合酶LovF表达的步骤。本发明通过完全敲除lovF基因阻断洛伐他汀合成而实现莫纳可林J的积累，再在此基础上用组成型启动子过表达转录调控因子lovE，使得构建得到的菌株的莫纳可林J产量进一步显著提高，并增强了该菌株的发酵稳定性。可以利用本发明的菌株直接发酵生产莫纳可林J，从而简化辛伐他汀的生产工艺，降低成本，提高生产效率，减少环境污染。
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