一种人NBS1蛋白赖氨酸388位点乳酸化抗原、抗体及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN118126155A

    公开(公告)日:2024-06-04

    申请号:CN202410164946.5

    申请日:2024-02-05

    摘要: 本发明提供了一种人NBS1蛋白赖氨酸388位点乳酸化抗原、抗体及其制备方法与应用,属于生物医药技术领域。本发明提供了一种人NBS1蛋白赖氨酸388位点乳酸化抗原肽,并采用该抗原肽制备针对人NBS1蛋白赖氨酸388位点乳酸化抗体。本发明的针对人NBS1蛋白赖氨酸388位点乳酸化抗体可检测正常细胞、肿瘤细胞及用药后肿瘤细胞的表达差异,有助于研究人NBS1蛋白的乳酸化修饰在肿瘤疾病发生发展过程中的作用,为临床肿瘤疾病的诊断或治疗提供潜在的作用靶点;本发明的针对人NBS1蛋白赖氨酸388位点乳酸化抗体可以检测人NBS1蛋白的乳酸化水平,探究其与肿瘤诊断、放化疗耐药的关系,在疾病诊断、治疗及预后判定等方面具有广泛的临床应用前景。

    一种单细胞内原位qPCR方法

    公开(公告)号:CN114107449B

    公开(公告)日:2024-04-09

    申请号:CN202010900980.6

    申请日:2020-08-31

    发明人: 尹东 张静源 张寅

    IPC分类号: C12Q1/6851

    摘要: 本发明公开了一种单细胞内原位qPCR方法。本发明的方法包括如下步骤:(1)将细胞消化,吹打成为单细胞悬液,去上清,将细胞沉淀重悬,加入甲醛溶液进行固定,之后加入Triton溶液进行打孔,去上清,将细胞沉淀重悬;(2)采用分子信标探针进行探针法RT‑qPCR。本发明的qPCR方法能看到单个细胞层面表达量的差异;不用将细胞分为单个细胞,不裂解细胞,而是让qPCR试剂和探针进入细胞内部,在细胞内部进行qPCR反应,方法简便快捷易操作。

    一种高通量靶向建库的方法和应用

    公开(公告)号:CN112266948A

    公开(公告)日:2021-01-26

    申请号:CN202011229857.2

    申请日:2020-11-06

    摘要: 本发明公开一种高通量靶向建库的方法和应用。本发明的方法包括如下步骤:基于检测的基因设计并合成靶向捕获探针和PCR扩增引物;将样本基因组DNA和靶向捕获探针杂交过夜,得到捕获的目的片段,环化,酶切,纯化,PCR扩增,得到构建的靶向测序文库;靶向测序文库纯化,检测文库DNA片段浓度和大小,二代测序,根据测序结果分析靶向测序文库的质量和测序信息。本发明能够在一轮PCR反应中扩增上百个检测基因,解决了多重PCR建库只能检测少量基因位点、实验条件难优化的不足;只有一轮PCR,且探针骨架上有随机barcode,减少PCR偏倚,能够区别PCR和测序引入的碱基错误;简化了建库步骤,减少了试剂和时间成本。

    一种鉴别人源细胞和小鼠源细胞的方法

    公开(公告)号:CN110412002A

    公开(公告)日:2019-11-05

    申请号:CN201910732262.X

    申请日:2019-08-08

    发明人: 尹东 王永强 张寅

    IPC分类号: G01N21/64

    摘要: 本发明公开了一种快速鉴别人源细胞和小鼠源细胞的方法,包括步骤:提供人源性/小鼠源性鉴定样本,用DAPI溶液孵育,再清洗样本,然后在荧光显微镜下进行观察鉴别:细胞核存在DAPI聚集斑的是小鼠来源样本,细胞核无DAPI聚集斑的样本来源于人。本发明在试剂和材料方面的损耗成本低廉,在荧光显微镜下即可进行观察实验,成本大概在20元/样,普通实验室均可以轻易实现;本发明鉴别操作流程简单,一般实验者均可轻易掌握操作;实验结果可以在半个小时内即可得出,极大减少了时间成本;该方法弥补了现有技术的缺陷,可以在普通实验室进行人源样本和小鼠源样本的快速分辨,有效增强实验室样本鉴别频率,避免交叉污染、减少不必要的损失。

    一种鉴别人源细胞和小鼠源细胞的方法

    公开(公告)号:CN110412002B

    公开(公告)日:2022-01-11

    申请号:CN201910732262.X

    申请日:2019-08-08

    发明人: 尹东 王永强 张寅

    IPC分类号: G01N21/64

    摘要: 本发明公开了一种快速鉴别人源细胞和小鼠源细胞的方法,包括步骤:提供人源性/小鼠源性鉴定样本,用DAPI溶液孵育,再清洗样本,然后在荧光显微镜下进行观察鉴别:细胞核存在DAPI聚集斑的是小鼠来源样本,细胞核无DAPI聚集斑的样本来源于人。本发明在试剂和材料方面的损耗成本低廉,在荧光显微镜下即可进行观察实验,成本大概在20元/样,普通实验室均可以轻易实现;本发明鉴别操作流程简单,一般实验者均可轻易掌握操作;实验结果可以在半个小时内即可得出,极大减少了时间成本;该方法弥补了现有技术的缺陷,可以在普通实验室进行人源样本和小鼠源样本的快速分辨,有效增强实验室样本鉴别频率,避免交叉污染、减少不必要的损失。