治疗和预防猪繁殖与呼吸综合征的反义DNA序列及其应用

    公开(公告)号:CN104195139A

    公开(公告)日:2014-12-10

    申请号:CN201410445817.X

    申请日:2014-09-03

    摘要: 本发明提供治疗和预防猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的反义DNA序列及其应用。所述单链反义DNA序列是以猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因部分序列作为靶点,设计并合成的20nt的反义DNA,不带有其他化学修饰。采用脂质体介导法转染猴肾上皮Marc-145细胞,能够显著抑制PRRSV在Marc-145细胞上的增殖,通过荧光定量RT-PCR方法和间接免疫荧光实验方法检测,发现该反义DNA序列具有显著下调猪繁殖与呼吸综合征病毒核蛋白基因表达、抑制病毒增殖的作用。因此本发明的反义DNA序列在猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的治疗和控制中具有广泛的应用前景,对基因治疗猪繁殖与呼吸综合征具有重要价值,所述反义DNA序列来源容易,成本低廉,具有极大的市场价值。

    B型牛库布病毒实时荧光定量检测方法

    公开(公告)号:CN118547112A

    公开(公告)日:2024-08-27

    申请号:CN202410625415.1

    申请日:2024-05-20

    摘要: 本发明属于病毒检测领域,提供了B型牛库布病毒实时荧光定量检测方法,包括以下步骤:确定特异性引物:针对BKV 3D基因的保守区域,采用一对特异性引物;核酸提取及反转录:用Trizol Reagent法提取总RNA,将RNA核酸反转录成cDNA,并保存于‑20℃;制备阳性标准品:用BKV的cDNA为模板,使用引物进行PCR反应及电泳检测,对PCR鉴定为阳性的克隆质粒测序,并构建出重组质粒,将测序结果正确的重组质粒作为模板;反应体系及条件的优化:反应体系为20μL体系,其对0.2~0.6μL引物浓度和57~64℃退火温度进行优化;建立标准曲线;本发明通过建立BKV实时荧光定量PCR检测方法,该方法操作简单、特异性强、敏感性高、重复性好,为BKV感染的临床诊断及分子流行病学调查提供了技术支撑。

    BVDV、BCoV、BRV及BNeV的四重RT-PCR检测引物组及检测方法

    公开(公告)号:CN118326084A

    公开(公告)日:2024-07-12

    申请号:CN202410586054.4

    申请日:2024-05-13

    IPC分类号: C12Q1/70 C12Q1/6851 C12R1/93

    摘要: 本发明属于病毒检测技术领域,提供了BVDV、BCoV、BRV及BNeV的四重RT‑PCR检测引物组及检测方法,方法包括以下步骤:S1、模板制备,使用BRV、BCoV、BVDV、BNeV的基因片段作为阳性样品模板;S2、以BRV、BCoV、BVDV、BNeV的基因片段为阳性样品模板,分别用各自引物对BRV‑VP6基因、BCoV‑NSP2基因、BVDV‑5’UTR基因、BNeV‑RDRP基因序列进行RT‑PCR扩增;S3、电泳分析;S4、胶回收、克隆和连接转化;S5、质粒提取和测序;S6、结果分析;本发明通过四重RT‑PCR检测法,获得与单一RT‑PCR检测法一样的特异性和敏感性,大大节省了检测成本,对临床标本的准确诊断和养牛业的健康发展具有较强的实用价值。

    一种根瘤菌及其应用
    4.
    发明公开

    公开(公告)号:CN117778229A

    公开(公告)日:2024-03-29

    申请号:CN202311453209.9

    申请日:2023-11-03

    摘要: 本发明涉及根瘤菌相关技术领域,公开了一种根瘤菌及其应用,所述根瘤菌是由云南省内土壤种植的楚雄南苜蓿根瘤中分离筛选获得,是一种高效固氮、耐盐碱能力强、耐酸铝能力强的根瘤菌;本发明还包括一种根瘤菌的应用,包括:所述根瘤菌在改良具有一定酸、铝种植土地中的应用;本发明的根瘤菌可以显著提高南苜蓿植株高度,有效促进南苜蓿生长,有效提高楚雄南苜蓿的结瘤数,从而大大提高南苜蓿的产量;本发明的根瘤菌具有优良的耐酸、耐铝特性,从而在应对种植地土壤具有酸、铝土地性质时,依旧可以达到稳定增产的效果。

    猪呼吸道疾病综合征的防控方法

    公开(公告)号:CN102599103B

    公开(公告)日:2014-02-12

    申请号:CN201210062701.9

    申请日:2012-03-12

    IPC分类号: A01K67/02

    摘要: 一种猪呼吸道疾病综合征的防控方法,包括如下步骤:本发明从源头控制猪呼吸道疾病综合征主要病毒性病原的发生,首先对猪场进行猪呼吸道疾病综合征的主要病原进行流行病学调查,查清主要病原,再对主要病毒病进行净化,科学使用疫苗保护易感猪群,继发细菌感染的,采取病料做细菌培养,并进行药敏试验,使用敏感药物治疗,同时加强猪场综合防控,达到控制自繁自养猪场猪呼吸道疾病综合征的目的。

    猪呼吸道疾病综合征的防控方法

    公开(公告)号:CN102599103A

    公开(公告)日:2012-07-25

    申请号:CN201210062701.9

    申请日:2012-03-12

    IPC分类号: A01K67/02

    摘要: 一种猪呼吸道疾病综合征的防控方法,包括如下步骤:本发明从源头控制猪呼吸道疾病综合征主要病毒性病原的发生,首先对猪场进行猪呼吸道疾病综合征的主要病原进行流行病学调查,查清主要病原,再对主要病毒病进行净化,科学使用疫苗保护易感猪群,继发细菌感染的,采取病料做细菌培养,并进行药敏试验,使用敏感药物治疗,同时加强猪场综合防控,达到控制自繁自养猪场猪呼吸道疾病综合征的目的。