绵羊组织中呈游离态的多潜能干细胞的分离培养方法及培养液

    公开(公告)号:CN111304155A

    公开(公告)日:2020-06-19

    申请号:CN201911167203.9

    申请日:2019-11-25

    IPC分类号: C12N5/074

    摘要: 本发明提供了绵羊组织中呈游离态的多潜能干细胞的分离培养方法及培养液,属于细胞培养技术领域。培养液是以DMEM为基础培养液,还包括L-谷氨酰胺、非必需氨基酸、丙酮酸钠、β-巯基乙醇和LIF、bFGF和FBS。分离培养方法,将绵羊胚层组织块清洗后置于培养液中,对所述组织块针刺,挤压后收集培养液、离心,收集上清液再次离心,收集沉淀,重悬细胞,培养。分离的多潜能干细胞能稳定表达与多潜能干细胞特性相关标志基因,同时不表达或弱表达Cx40和Cx43。该方法的建立无论对干细胞的进一步深入研究还是对器官组织发育、疫病机理研究及其防控都具有重要的意义。

    绵羊组织中呈游离态的多潜能干细胞的分离培养方法及培养液

    公开(公告)号:CN111304155B

    公开(公告)日:2021-08-20

    申请号:CN201911167203.9

    申请日:2019-11-25

    IPC分类号: C12N5/074

    摘要: 本发明提供了绵羊组织中呈游离态的多潜能干细胞的分离培养方法及培养液,属于细胞培养技术领域。培养液是以DMEM为基础培养液,还包括L‑谷氨酰胺、非必需氨基酸、丙酮酸钠、β‑巯基乙醇和LIF、bFGF和FBS。分离培养方法,将绵羊胚层组织块清洗后置于培养液中,对所述组织块针刺,挤压后收集培养液、离心,收集上清液再次离心,收集沉淀,重悬细胞,培养。分离的多潜能干细胞能稳定表达与多潜能干细胞特性相关标志基因,同时不表达或弱表达Cx40和Cx43。该方法的建立无论对干细胞的进一步深入研究还是对器官组织发育、疫病机理研究及其防控都具有重要的意义。

    一种柳叶鼠李温室育苗方法

    公开(公告)号:CN108207465B

    公开(公告)日:2020-08-25

    申请号:CN201810009440.1

    申请日:2018-01-05

    IPC分类号: A01G17/00

    摘要: 本发明公开了一种柳叶鼠李温室育苗方法,包括以下步骤:步骤1.采种:每年9‑10月采种,将采集的种子用水洗去果肉及杂质,即可播种,或者采收后晾干,留作以后播种;步骤2.整地;步骤3.播种育苗:采用条播的方式;播种前先将床面灌透水,晾至土壤湿润且松散即可播种,播种时先将床面刮平、拍实,然后用开沟器每15cm开0.5cm深的沟槽,将种子均匀撒入沟中,覆土、镇压后喷湿床面即可,播种量75kg/hm2;步骤4.苗期管理,播种后,每天撒水一次;及早铲除杂草;步骤5.移栽。本发明采用柳叶鼠李温室育苗的方法,可以在秋季采收后和翌年早春播种,大大提高出苗、保苗率,应用前景广阔。

    一种动物原代干细胞除菌培养液的制备方法

    公开(公告)号:CN112080461B

    公开(公告)日:2022-03-22

    申请号:CN202010959879.8

    申请日:2020-09-14

    IPC分类号: C12N5/073 C12N5/0735

    摘要: 本发明属于分离培养原代干细胞技术领域,公开了一种动物原代干细胞除菌培养液的制备方法,无菌条件下,取孕中期绵羊胎儿,剪切相应组织于培养液II中静置;采用组织机械分离方法分离,用培养液I于37℃5%CO2饱和湿度条件下培养绵羊胎儿组织原代细胞48h~96h;细胞克隆出现后用D‑PBS洗3遍,挑取状态较好的细胞克隆用培养液III培养,培养至3~4代冻存备用。本发明所配置的培养液能100%确保在96h内分离培养动物原代干细胞时无细菌性污染发生。同时本发明所采用的培养液能够保证分离的动物原代细胞保持干细胞特性。本发明能够确保在从动物组织中分离培养原代的干细胞的过程不发生细菌或真菌性污染。

    一种柳叶鼠李温室育苗方法

    公开(公告)号:CN108207465A

    公开(公告)日:2018-06-29

    申请号:CN201810009440.1

    申请日:2018-01-05

    IPC分类号: A01G17/00

    CPC分类号: A01G17/005

    摘要: 本发明公开了一种柳叶鼠李温室育苗方法,包括以下步骤:步骤1.采种:每年9‑10月采种,将采集的种子用水洗去果肉及杂质,即可播种,或者采收后晾干,留作以后播种;步骤2.整地;步骤3.播种育苗:采用条播的方式;播种前先将床面灌透水,晾至土壤湿润且松散即可播种,播种时先将床面刮平、拍实,然后用开沟器每15cm开0.5cm深的沟槽,将种子均匀撒入沟中,覆土、镇压后喷湿床面即可,播种量75kg/hm2;步骤4.苗期管理,播种后,每天撒水一次;及早铲除杂草;步骤5.移栽。本发明采用柳叶鼠李温室育苗的方法,可以在秋季采收后和翌年早春播种,大大提高出苗、保苗率,应用前景广阔。

    一种便于观察测量的种子发芽板装置

    公开(公告)号:CN114902835A

    公开(公告)日:2022-08-16

    申请号:CN202210607153.7

    申请日:2022-05-31

    IPC分类号: A01C1/02

    摘要: 本发明公开了一种便于观察测量的种子发芽板装置,包括发芽板、储水盒;所述发芽板放置于储水盒中;所述发芽板包括发芽板盖板、底板、吸水棉线、滤纸、支撑杆、置种条;所述储水盒包括水槽、储水盒盖板、支架、固定卡扣;本发明的便于观察测量的种子发芽板装置,便于观察的同时有效防止种子的位置发生移动,同时保证种子均匀分布,保证种子的幼苗以及根系彼此独立不交叉缠绕的生长情况,便于观察、对比、测量,保证了充足但不过量的水分供应,操作方便,节省人力,结构简单,制作成本低,后期维护费低,应用性好。

    一种动物原代干细胞除菌培养液的制备方法

    公开(公告)号:CN112080461A

    公开(公告)日:2020-12-15

    申请号:CN202010959879.8

    申请日:2020-09-14

    IPC分类号: C12N5/073 C12N5/0735

    摘要: 本发明属于分离培养原代干细胞技术领域,公开了一种动物原代干细胞除菌培养液的制备方法,无菌条件下,取孕中期绵羊胎儿,剪切相应组织于培养液II中静置;采用组织机械分离方法分离,用培养液I于37℃5%CO2饱和湿度条件下培养绵羊胎儿组织原代细胞48h~96h;细胞克隆出现后用D‑PBS洗3遍,挑取状态较好的细胞克隆用培养液III培养,培养至3~4代冻存备用。本发明所配置的培养液能100%确保在96h内分离培养动物原代干细胞时无细菌性污染发生。同时本发明所采用的培养液能够保证分离的动物原代细胞保持干细胞特性。本发明能够确保在从动物组织中分离培养原代的干细胞的过程不发生细菌或真菌性污染。