公开(公告)号：CN101586111B

公开(公告)日：2012-03-07

申请号：CN200810098008.0

申请日：2008-05-22

申请人： 北京三元基因工程有限公司 ,  北京毕艾欧科技发展有限责任公司

发明人： 牛春 ,  刘金毅 ,  高天星 ,  孙俭波 ,  程永庆

IPC分类号： C12N15/60 ,  C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  C12R1/225

摘要： 本发明公开了一种活性乳酸乳球菌制品的制备方法，包括菌种的构建(质粒构建、连接、转化、筛选)、配制发酵培养基、菌种活化、接种发酵、收菌和干燥工艺过程，本方法采用了高表达的菌株、优化的培养基配方，为延长菌体的对数生长期采用了pH调控等方法，最终使发酵体系中菌体密度提高100倍，活菌得率大于1011CFU/ml，PAL蛋白表达量大于12％；所得菌体具有高效转化苯丙氨酸生成肉桂酸的能力，PAL酶比活性大于50U/g；所得菌粉稳定性好，在4℃保存6个月，活菌数仍可达1010CFU/g以上，并且PAL酶比活性无明显降低；发酵成本降低2/3。因此利用本发明可方便地大量提供低成本的PAL用于PKU治疗。

公开(公告)号：CN101586111A

公开(公告)日：2009-11-25

申请号：CN200810098008.0

申请日：2008-05-22

申请人： 北京三元基因工程有限公司 ,  北京毕艾欧科技发展有限责任公司

发明人： 牛春 ,  刘金毅 ,  高天星 ,  孙俭波 ,  程永庆

IPC分类号： C12N15/60 ,  C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  C12R1/225

摘要： 本发明公开了一种活性乳酸乳球菌制品的制备方法，包括菌种的构建(质粒构建、连接、转化、筛选)、配制发酵培养基、菌种活化、接种发酵、收菌和干燥工艺过程，本方法采用了高表达的菌株、优化的培养基配方，为延长菌体的对数生长期采用了pH调控等方法，最终使发酵体系中菌体密度提高100倍，活菌得率大于1011CFU/ml，PAL蛋白表达量大于12％；所得菌体具有高效转化苯丙氨酸生成肉桂酸的能力，PAL酶比活性大于50U/g；所得菌粉稳定性好，在4℃保存6个月，活菌数仍可达1010CFU/g以上，并且PAL酶比活性无明显降低；发酵成本降低2/3。因此利用本发明可方便地大量提供低成本的PAL用于PKU治疗。