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公开(公告)号：CN101586111B
公开(公告)日：2012-03-07
申请号：CN200810098008.0
申请日：2008-05-22
申请人： 北京三元基因工程有限公司 , 北京毕艾欧科技发展有限责任公司
摘要： 本发明公开了一种活性乳酸乳球菌制品的制备方法，包括菌种的构建(质粒构建、连接、转化、筛选)、配制发酵培养基、菌种活化、接种发酵、收菌和干燥工艺过程，本方法采用了高表达的菌株、优化的培养基配方，为延长菌体的对数生长期采用了pH调控等方法，最终使发酵体系中菌体密度提高100倍，活菌得率大于1011CFU/ml，PAL蛋白表达量大于12％；所得菌体具有高效转化苯丙氨酸生成肉桂酸的能力，PAL酶比活性大于50U/g；所得菌粉稳定性好，在4℃保存6个月，活菌数仍可达1010CFU/g以上，并且PAL酶比活性无明显降低；发酵成本降低2/3。因此利用本发明可方便地大量提供低成本的PAL用于PKU治疗。
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公开(公告)号：CN102358890A
公开(公告)日：2012-02-22
申请号：CN201110339617.2
申请日：2011-11-01
申请人： 北京三元基因工程有限公司 , 北京毕艾欧科技发展有限责任公司
摘要： 本发明属于生物医药领域，涉及表达苯丙氨酸解氨酶的乳酸乳球菌制品的制备方法，按顺序包括如下步骤：1）获得表达苯丙氨酸解氨酶的基因；2）将表达苯丙氨酸解氨酶的基因与适于转化乳酸乳球菌的表达载体相连接形成重组表达载体；3）将重组表达载体转化感受态的乳酸乳球菌；4）筛选获得高效表达苯丙氨酸解氨酶的乳酸乳球菌菌株；5）发酵乳酸乳球菌并诱导表达苯丙氨酸解氨酶；6）干燥发酵收获的菌体，其中在步骤5）的发酵时使用的培养基由体积比4∶6-6∶4的配制中间培养基与M17肉汤培养基混合得到，并将pH值调节到6.5-7.5。采用本发明的技术方案可使获得的乳酸乳球菌活菌数和其中苯丙氨酸解氨酶的比活力大幅提高，其中前者可达到1012CFU/ml以上，后者可达到80U/g以上。
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公开(公告)号：CN102358889A
公开(公告)日：2012-02-22
申请号：CN201110339604.5
申请日：2011-11-01
申请人： 北京三元基因工程有限公司 , 北京毕艾欧科技发展有限责任公司
摘要： 本发明属于生物医药领域，涉及表达苯丙氨酸解氨酶的乳酸乳球菌制品的制备方法，按顺序包括如下步骤：1）获得表达苯丙氨酸解氨酶的基因；2）将表达苯丙氨酸解氨酶的基因与适于转化乳酸乳球菌的表达载体相连接形成重组表达载体；3）将重组表达载体转化感受态的乳酸乳球菌；4）筛选获得高效表达苯丙氨酸解氨酶的乳酸乳球菌菌株；5）发酵乳酸乳球菌并诱导表达苯丙氨酸解氨酶；6）干燥发酵收获的菌体，其中在步骤5）的发酵的诱导前调节发酵液的pH为6.0-6.5进行培养，诱导后将pH调节到6.5-7.5继续培养直至发酵结束。采用本发明的技术方案可使获得的乳酸乳球菌活菌数和其中苯丙氨酸解氨酶的比活力大幅提高，其中前者可达到1012CFU/ml以上，后者可达到80U/g以上。
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公开(公告)号：CN101586111A
公开(公告)日：2009-11-25
申请号：CN200810098008.0
申请日：2008-05-22
申请人： 北京三元基因工程有限公司 , 北京毕艾欧科技发展有限责任公司
摘要： 本发明公开了一种活性乳酸乳球菌制品的制备方法，包括菌种的构建(质粒构建、连接、转化、筛选)、配制发酵培养基、菌种活化、接种发酵、收菌和干燥工艺过程，本方法采用了高表达的菌株、优化的培养基配方，为延长菌体的对数生长期采用了pH调控等方法，最终使发酵体系中菌体密度提高100倍，活菌得率大于1011CFU/ml，PAL蛋白表达量大于12％；所得菌体具有高效转化苯丙氨酸生成肉桂酸的能力，PAL酶比活性大于50U/g；所得菌粉稳定性好，在4℃保存6个月，活菌数仍可达1010CFU/g以上，并且PAL酶比活性无明显降低；发酵成本降低2/3。因此利用本发明可方便地大量提供低成本的PAL用于PKU治疗。
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公开(公告)号：CN103721244A
公开(公告)日：2014-04-16
申请号：CN201410007806.3
申请日：2014-01-08
申请人： 北京三元基因工程有限公司
IPC分类号： A61K38/21 , A61K9/72 , A61P11/00 , A61P31/12 , A61K31/7036
摘要： 本发明属于抗病毒药物的组合物领域，涉及干扰素α与硫酸庆大霉素的雾化吸入剂。所述的雾化吸入剂含有治疗有效量的干扰素α、硫酸庆大霉素，以及适宜量的可药用辅料；优选单次给药剂量中含有1-30μg的干扰素α，0.5-15mg的硫酸庆大霉素，以及适宜量的可药用辅料；更优选单次给药剂量中含有2.5-10μg的干扰素α，2-10mg的与硫酸庆大霉素，以及适宜量的可药用辅料。用本发明的干扰素α与硫酸庆大霉素的雾化吸入剂治疗病毒性肺炎，可较单独使用干扰素α或硫酸庆大霉素治疗明显提高疗效。
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公开(公告)号：CN104888196A
公开(公告)日：2015-09-09
申请号：CN201510357975.4
申请日：2015-06-25
申请人： 北京三元基因工程有限公司
IPC分类号： A61K38/21 , A61K9/08 , A61K47/42 , A61K47/10 , A61P31/20 , A61P1/16 , A61P31/14 , A61P35/02 , A61P35/00
摘要： 本发明属于蛋白质药物的制剂领域，涉及一种稳定的干扰素α多剂量笔注射液，其含有治疗有效量的干扰素α与适宜量的注射液可药用辅料，所述的注射液可药用辅料包含白蛋白与酚类防腐剂。本发明的干扰素α的多剂量笔注射液可在多次使用过程中保持安全、有效、稳定。
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公开(公告)号：CN103721244B
公开(公告)日：2015-03-18
申请号：CN201410007806.3
申请日：2014-01-08
申请人： 北京三元基因工程有限公司
IPC分类号： A61K38/21 , A61K9/72 , A61P11/00 , A61P31/12 , A61K31/7036
摘要： 本发明属于抗病毒药物的组合物领域，涉及干扰素α与硫酸庆大霉素的雾化吸入剂。所述的雾化吸入剂含有治疗有效量的干扰素α、硫酸庆大霉素，以及适宜量的可药用辅料；优选单次给药剂量中含有1-30μg的干扰素α，0.5-15mg的硫酸庆大霉素，以及适宜量的可药用辅料；更优选单次给药剂量中含有2.5-10μg的干扰素α，2-10mg的与硫酸庆大霉素，以及适宜量的可药用辅料。用本发明的干扰素α与硫酸庆大霉素的雾化吸入剂治疗病毒性肺炎，可较单独使用干扰素α或硫酸庆大霉素治疗明显提高疗效。
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公开(公告)号：CN102358890B
公开(公告)日：2013-07-17
申请号：CN201110339617.2
申请日：2011-11-01
申请人： 北京三元基因工程有限公司
摘要： 本发明属于生物医药领域，涉及表达苯丙氨酸解氨酶的乳酸乳球菌制品的制备方法，按顺序包括如下步骤：1）获得表达苯丙氨酸解氨酶的基因；2）将表达苯丙氨酸解氨酶的基因与适于转化乳酸乳球菌的表达载体相连接形成重组表达载体；3）将重组表达载体转化感受态的乳酸乳球菌；4）筛选获得高效表达苯丙氨酸解氨酶的乳酸乳球菌菌株；5）发酵乳酸乳球菌并诱导表达苯丙氨酸解氨酶；6）干燥发酵收获的菌体，其中在5）的发酵时使用的培养基由体积比4∶6-6∶4的配制中间培养基与M17肉汤培养基混合得到，并将pH值调节到6.5-7.5。采用本发明的技术方案可使获得的乳酸乳球菌活菌数和其中苯丙氨酸解氨酶的比活力大幅提高，其中前者可达到1012CFU/ml以上，后者可达到80U/g以上。
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公开(公告)号：CN102358889B
公开(公告)日：2013-07-17
申请号：CN201110339604.5
申请日：2011-11-01
申请人： 北京三元基因工程有限公司
摘要： 本发明属于生物医药领域，涉及表达苯丙氨酸解氨酶的乳酸乳球菌制品的制备方法，按顺序包括如下步骤：1）获得表达苯丙氨酸解氨酶的基因；2）将表达苯丙氨酸解氨酶的基因与适于转化乳酸乳球菌的表达载体相连接形成重组表达载体；3）将重组表达载体转化感受态的乳酸乳球菌；4）筛选获得高效表达苯丙氨酸解氨酶的乳酸乳球菌菌株；5）发酵乳酸乳球菌并诱导表达苯丙氨酸解氨酶；6）干燥发酵收获的菌体，其中在5）的发酵的诱导前调节发酵液的pH为6.0-6.5进行培养，诱导后将pH调节到6.5-7.5继续培养直至发酵结束。采用本发明的技术方案可使获得的乳酸乳球菌活菌数和其中苯丙氨酸解氨酶的比活力大幅提高，其中前者可达到1012CFU/ml以上，后者可达到80U/g以上。
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公开(公告)号：CN302200195S
公开(公告)日：2012-11-28
申请号：CN201230436778.9
申请日：2012-09-13
申请人： 北京三元基因工程有限公司
摘要： 1．本外观设计产品的名称：包装盒（重组人干扰素α1b滴眼液）。2．本外观设计产品的用途：用于药品包装。3．本外观设计的设计要点：在于产品的图案。主视图与后视图完全一致，省略后视图。4．最能表明设计要点的图片或者照片：主视图最能表明本外观设计的设计要点。
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