一种子宫内膜干细胞的分离培养方法及其专用培养基

    公开(公告)号:CN109852582A

    公开(公告)日:2019-06-07

    申请号:CN201711239839.0

    申请日:2017-11-30

    IPC分类号: C12N5/0775

    摘要: 本发明涉及一种子宫内膜干细胞的分离培养方法,包括洗涤、消化、原代培养和传代培养步骤,其中原代培养过程中,培养3-8h,将培养皿中未贴壁细胞移入新的培养皿,更换培养基后继续培养3-4天,然后收取贴壁细胞并标记P01代细胞,将培养基中未贴壁细胞移入新的培养皿,更换培养基后继续培养4-6天,收取贴壁细胞,并标记为P02代细胞;在传代培养过程中,第一代采取P01代细胞和P02代细胞分别独立培养的方法,在第二代之后,进行混合培养。采用上述方法,得到的子宫内膜干细胞得率高、纯度高,得到的子宫内膜干细胞可进行多次传代,多次传代后得到的干细胞具有高度分化的潜能。

    一种用于组织移植的脂肪组织及其制备方法

    公开(公告)号:CN109847096A

    公开(公告)日:2019-06-07

    申请号:CN201711241869.5

    申请日:2017-11-30

    摘要: 本发明提供了一种用于组织移植的脂肪组织及其制备方法,通过将种子细胞接种到生物支架中而成,可以形成空间结构、防止脂肪组织植入体内后发生液化;同时添加细胞生长促进物质,可以促进脂肪组织植入体内后细胞的增殖和更新,从而加快组织更新和伤口愈合;传代培养基中添加细胞生长因子,可以有效促进间充质干细胞的分裂和更新,提高培养的速度和质量;为保证诱导培养基和细胞生长促进物质溶液可以充分渗透到细胞间隙中,事先对其进行超声处理,以便将液体分散成小液滴、提高其渗透性。通过上述手段,可以提高脂肪组织培养的速率和移植后的存活率,从而提高脂肪组织移植的成功率。

    一种活体细胞玻璃化冷冻液及冷冻复苏的方法

    公开(公告)号:CN109819975A

    公开(公告)日:2019-05-31

    申请号:CN201910060107.8

    申请日:2019-01-22

    IPC分类号: A01N1/02

    摘要: 本发明提供了一种活体细胞玻璃化冷冻液及冷冻复苏的方法。本发明提供的冷冻液以体积比为1:1的MEM培养基和F12培养基为基础,添加50-60nmol/L的异嗪皮啶、20-30nmol/L的绿原酸和40-48μmol/L的保护剂;所述保护剂包括羟乙基淀粉、茶多酚、4-羟乙基哌嗪乙磺酸、香菇多糖、腺嘌呤核苷三磷酸中的一种或多种。本发明提供的活体细胞玻璃化冷冻液能够提高活体细胞的存活率、体外受精发育率、卵裂率和囊胚率。

    一种肿瘤组织TIL细胞制备方法及专用培养基

    公开(公告)号:CN107384867B

    公开(公告)日:2020-09-11

    申请号:CN201710662001.6

    申请日:2017-08-04

    IPC分类号: C12N5/09 C12N5/0783

    摘要: 本发明涉及肿瘤组织TIL细胞制备方法及专用培养基,所述方法包括:瘤旁组织获取、细胞消化、细胞原代培养、细胞传代培养和细胞收集步骤,其中,原代培养基为以RPMI 1640培养基为基础,包含以下浓度组分:10%体积的人源血清、20‑45ng/ml的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、1‑5mg/ml的核黄素、70‑90ng/ml的皮质醇、10‑25mg/ml的一水磷酸二氢钠、47‑62ng/ml的重组人白血病抑制因子(LIF)、500‑800U/ml的IL‑2;传代培养基为以RPMI 1640培养基为基础,包含以下浓度组分:10%体积的人源血清、20‑40mmol/L的HEPES、1000‑2000U/ml的IL‑2、0.03‑0.07mmol/L的β‑巯基乙醇、5‑15ng/ml磷酸钠。对现有培养基进行了改良,采用不同的培养基对TIL细胞进行针对性培养,提高TIL细胞的扩增能力,同时减少培养周期,降低培养复杂程度,减少了IL‑2的使用量,从而降低毒性反应。

    一种用于脂肪骨髓采集用套装

    公开(公告)号:CN106070185B

    公开(公告)日:2018-12-28

    申请号:CN201610622783.6

    申请日:2016-08-01

    IPC分类号: A01N1/02

    CPC分类号: A61N1/02

    摘要: 本发明提供一种用于脂肪骨髓采集用套装,包括采集盒、内装有脂肪骨髓细胞保护液的保护液瓶、两支采集管、若干冰盒、采集套装使用说明、采集卡和一套条形码,所述采集盒包括盒体、与所述盒体铰接的盒盖和安装在盒体内底部的底托,所述底托上设有用于放置保护液瓶的保护液瓶插孔和用于放置采集管的两个采集管插孔,所述盒体内设有环绕所述底托的隔板,所述隔板与盒体底面垂直,所述冰盒放置在所述盒体侧壁与所述隔板之间形成的空腔内,所述盒盖上表面还设有用于放置采集套装使用说明、采集卡和条形码的凹槽,所述凹槽上设有与凹槽匹配的盖板。本发明具有隔热、减震、温度监测的功能,可有效保证采集的脂肪骨髓细胞的保存和运输安全。

    一种皮肤精原细胞保护液
    10.
    发明公开

    公开(公告)号:CN107668023A

    公开(公告)日:2018-02-09

    申请号:CN201610622068.2

    申请日:2016-08-01

    IPC分类号: A01N1/02

    CPC分类号: A01N1/0215 A01N1/0226

    摘要: 本发明公开了一种皮肤精原细胞保护液,具体技术方案如下:一种皮肤精原细胞的保护液所述保护液主要是将氨基糖苷类抗生素用DMEM培养基水溶液溶解而成,每毫升所述DMEM培养基水溶液分别溶解所述氨基糖苷类抗生素为50-200单位,所述DMEM培养基水溶液的浓度为10-25g/L。优选的,所述氨基糖苷类抗生素选自庆大霉素、卡那霉素、阿米卡星或妥布霉素中的一种或多种。优选的,所述保护液还包括氧合血红蛋白、吐温80、棕榈酰胺、海藻酸钾、月桂酰肌氨酸、柠檬酸、丙酮酸、延胡索酸和乙酰辅酶A。本发明的有益效果是提供了皮肤精原细胞的适宜和稳定保存环境,可以显著提高皮肤精原细胞保存后的细胞活力。