一种子宫内膜干细胞的分离培养方法及其专用培养基

    公开(公告)号:CN109852582B

    公开(公告)日:2021-04-30

    申请号:CN201711239839.0

    申请日:2017-11-30

    IPC分类号: C12N5/0775

    摘要: 本发明涉及一种子宫内膜干细胞的分离培养方法,包括洗涤、消化、原代培养和传代培养步骤,其中原代培养过程中,培养3‑8h,将培养皿中未贴壁细胞移入新的培养皿,更换培养基后继续培养3‑4天,然后收取贴壁细胞并标记P01代细胞,将培养基中未贴壁细胞移入新的培养皿,更换培养基后继续培养4‑6天,收取贴壁细胞,并标记为P02代细胞;在传代培养过程中,第一代采取P01代细胞和P02代细胞分别独立培养的方法,在第二代之后,进行混合培养。采用上述方法,得到的子宫内膜干细胞得率高、纯度高,得到的子宫内膜干细胞可进行多次传代,多次传代后得到的干细胞具有高度分化的潜能。

    一种直接应用的间充质干细胞冻存液及其制备方法

    公开(公告)号:CN109845722A

    公开(公告)日:2019-06-07

    申请号:CN201711239733.0

    申请日:2017-11-30

    IPC分类号: A01N1/02

    摘要: 本发明提供一种直接应用的间充质干细胞冻存液及其制备方法,该冻存液主要由生理盐水、羟乙基-β-环糊精、聚乙二醇微球和甘油按照一定的重量份组成,该冻存液本将DMSO替换成生理盐水,克服了DMSO超过用量范围后可能存在的风险问题,并且在生理盐水内加入羟乙基-β-环糊精、聚乙二醇微球和甘油的混合物制成的冻存液可显著提高该冻存液对间充质干细胞冻存的时间,长期保存细胞的活力,并且该冻存液不用经过洗涤可直接应用于人体。

    一种人原代肿瘤细胞分离制备方法

    公开(公告)号:CN107384866A

    公开(公告)日:2017-11-24

    申请号:CN201710661998.3

    申请日:2017-08-04

    IPC分类号: C12N5/09 A01N1/02

    摘要: 本发明涉及一种人原代肿瘤细胞分离制备方法,所述方法包括:用0.9%的氯化钠注射液冲洗分离出的肿瘤组织,去除血渍,剪除坏死及结缔组织;将肿瘤组织剪成1mm3大小,放置于离心管内,在该离心管中加入I型胶原酶,过夜冷消化,次日加入透明质酸酶和DNA酶,消化,将消化后的混合液过细胞筛网,收集滤液,离心,去上清,得单细胞悬液;加入无血清原代培养基,吹打混匀、细胞计数,接种于培养瓶中,补充无血清原代培养基后,放置于二氧化碳恒温恒湿培养箱中培养;冻存。本发明所提供的人原代肿瘤细胞制备方法制备的细胞获得率高,增殖快,可提高人原代肿瘤细胞的增殖能力和增殖速度、减少培养周期,具有显著的进步。

    一种脐带、脐血、胎盘采集用套装

    公开(公告)号:CN106264558A

    公开(公告)日:2017-01-04

    申请号:CN201610622016.5

    申请日:2016-08-01

    IPC分类号: A61B5/15 A01N1/02

    摘要: 本发明提供了一种脐带、脐血、胎盘采集用套装,包括采集箱和与所述采集箱铰接的箱盖,所述采集箱内设有工具盒、冷藏盒和冷冻盒;所述工具盒内设有衬板,所述衬板上设有容纳槽、至少3个置物槽和若干试管槽,所述容纳槽内设有至少3根真空采血管,三个所述置物槽内分别设有脐带采集盒、胎盘采集盒和采血袋;所述冷藏盒内放置有盛放细胞保护液的试剂瓶;所述冷冻盒内设有若干冰袋。本发明提供的采集用套装结构简单,内置的采集工具齐全而且位置放置明确,医护人员使用比较方便,此外,该套装能够同时用于采集脐带、脐带血和胎盘,该套装中含有冷藏盒,能够为组织运输和保存提供适宜的环境,提高了脐带、脐带血和胎盘采集和运输的安全性。

    一种肿瘤组织TIL细胞制备方法及专用培养基

    公开(公告)号:CN107384867B

    公开(公告)日:2020-09-11

    申请号:CN201710662001.6

    申请日:2017-08-04

    IPC分类号: C12N5/09 C12N5/0783

    摘要: 本发明涉及肿瘤组织TIL细胞制备方法及专用培养基,所述方法包括:瘤旁组织获取、细胞消化、细胞原代培养、细胞传代培养和细胞收集步骤,其中,原代培养基为以RPMI 1640培养基为基础,包含以下浓度组分:10%体积的人源血清、20‑45ng/ml的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、1‑5mg/ml的核黄素、70‑90ng/ml的皮质醇、10‑25mg/ml的一水磷酸二氢钠、47‑62ng/ml的重组人白血病抑制因子(LIF)、500‑800U/ml的IL‑2;传代培养基为以RPMI 1640培养基为基础,包含以下浓度组分:10%体积的人源血清、20‑40mmol/L的HEPES、1000‑2000U/ml的IL‑2、0.03‑0.07mmol/L的β‑巯基乙醇、5‑15ng/ml磷酸钠。对现有培养基进行了改良,采用不同的培养基对TIL细胞进行针对性培养,提高TIL细胞的扩增能力,同时减少培养周期,降低培养复杂程度,减少了IL‑2的使用量,从而降低毒性反应。