微孔电泳装置和核酸片段分选方法

    公开(公告)号:CN118817811A

    公开(公告)日:2024-10-22

    申请号:CN202410920647.X

    申请日:2024-07-10

    发明人: 刘毅权 李世学

    IPC分类号: G01N27/447 C12N15/10

    摘要: 本申请提供一种本申请提供的微孔电泳装置和核酸片段分选方法,当微孔电泳装置处于片段迁移状态时,多个电泳槽相互连通,为核酸片段在加样槽和电泳槽、相邻电泳槽之间的迁移提供的了结构基础,为不同长度核酸片段的分离提供了结构支持。当微孔电泳装置切换至分区吸附状态时,多个电泳槽被划分为至少两个相互独立的区域,避免分离后的不同长度的核酸片段混淆,有利于后续再使用磁珠对目标核酸片段所在的目标片段区域进行吸附,使得磁珠可吸附高纯度的目标核酸片段,对磁珠进行洗脱后即可实现核酸片段分选。使用一次磁珠吸附即可完成分选过程,避免了磁珠的浪费,提高了磁珠的利用率。

    文库的制备方法及其应用和接头及试剂盒

    公开(公告)号:CN117822130A

    公开(公告)日:2024-04-05

    申请号:CN202311837370.6

    申请日:2023-12-28

    摘要: 本发明公开了一种文库的制备方法及其应用和接头及试剂盒,该方法包括如下步骤:(a)获得包含多个具有两个末端的双链DNA(dsDNA)分子的样品;(b)提供多个环状接头;(c)将多个环状接头连接到多个所述dsDNA分子的两个末端,以生成多个第一环状接头‑dsDNA‑环状接头构建体;(d)扩增多个第一环状接头‑dsDNA‑环状接头构建体以产生多个环状接头‑dsDNA构建体;(e)将多个环状接头连接到多个所述环状接头‑dsDNA构建体的第二末端,以生成多个第二环状接头‑dsDNA‑环状接头构建体;(f)消化多个第二环状接头‑dsDNA‑环状接头构建体并且进行变性,以产生所述文库。本发明的制备方法提高了文库制备的成功率。

    锁核酸修饰的分子条形码、反向引物、引物组、试剂盒和抑制非特异性扩增的方法及应用

    公开(公告)号:CN117126931A

    公开(公告)日:2023-11-28

    申请号:CN202210551546.0

    申请日:2022-05-18

    发明人: 李世学

    摘要: 本发明涉及分子生物技术领域,尤其涉及锁核酸修饰的分子条形码、反向引物、引物组、试剂盒和抑制非特异性扩增的方法及应用;该分子条形码的碱基总数Q≥10,且简并碱基N的数量≥8,该分子条形码含有m个锁核酸修饰的位点,m个锁核酸修饰的位点将该分子条形码分为m+1段序列,其中,每段序列的碱基数量为2~4个,m≥2,每段序列通过锁核酸修饰的位点使得碱基数量均匀分布,避免扩增引物中接头引物之间的直接结合,从而能抑制正向引物和反向引物之间的接头自连,减少了正向引物和反向引物之间因接头自连而产生的非特异性扩增产物,因此能减少基因重排检测中的非特异性扩增产物。

    检测免疫球蛋白基因重排的试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN116837079A

    公开(公告)日:2023-10-03

    申请号:CN202210293013.7

    申请日:2022-03-23

    发明人: 李世学

    IPC分类号: C12Q1/6858 C12N15/11

    摘要: 本申请涉及基因检测技术领域,提供了一种检测免疫球蛋白基因重排的试剂盒及其检测方法,所述试剂盒包含正向引物、反向引物和接头引物,所述反向引物中依次包含能与免疫球蛋白重链基因特异性结合的核苷酸序列、随机标签和高通量测序平台适用的测序接头的核苷酸序列。本申请在靶向IgH连接区(J区)的反向引物中连接随机标签,采用该反向引物进行PCR扩增,扩增产物经过测序可以获得目的片段及随机标签序列,其能够有效消除PCR扩增导致的偏倚,能够显著提高测序的均一度和检测准确度。