一种alpha-L-鼠李糖苷酶、其制备方法及应用

    公开(公告)号:CN113584001B

    公开(公告)日:2024-05-28

    申请号:CN202110019048.7

    申请日:2021-01-07

    Inventor: 袁其朋 程磊雨

    Abstract: 本发明公开了一种alpha‑L‑鼠李糖苷酶、其制备方法及应用。具体涉及一种新型alpha‑L‑鼠李糖苷酶的氨基酸序列、编码上述氨基酸序列的核苷酸序列、含有上述核苷酸序列的重组载体和重组宿主、利用上述重组宿主制备alpha‑L‑鼠李糖苷酶的方法以及所述alpha‑L‑鼠李糖苷酶在宝霍苷I生产中的应用。本发明所提供的alpha‑L‑鼠李糖苷酶具有催化效率高、热稳定性好、特异性高等优点。朝藿定C经葡萄糖苷酶快速催化水解后,再利用本发明中所提供的alpha‑L‑鼠李糖苷酶进一步催化水解其C3位置外侧鼠李糖苷键生成宝霍苷I,底物转化率高达99.5%、转化效率高、无副产物、步骤简单、反应时间短、污染小、适合工业化生产。

    一种利用两步酶解法转化黄芪甲苷制备环黄芪醇的方法

    公开(公告)号:CN107058445B

    公开(公告)日:2020-11-20

    申请号:CN201710319796.0

    申请日:2017-05-09

    Inventor: 袁其朋 程磊雨

    Abstract: 本发明公开了一种利用两步酶解法转化黄芪甲苷制备环黄芪醇的方法。具体涉及一种以黄芪甲苷为底物,利用两种不同的水解酶分别水解断裂黄芪甲苷C3位置的β‑木糖苷键和C6位置的β‑葡萄糖苷键而得到黄芪甲苷的苷元环黄芪醇,后经萃取、硅胶柱层析以及乙醇重结晶纯化得到纯度95%以上的环黄芪醇产品。本发明解决了化学法制备环黄芪醇过程中黄芪甲苷的三元环结构的破坏而导致的大量副产物的产生的问题以及克服了传统环黄芪醇制备方法中底物转化率低、步骤繁琐、污染环境等不足。而本发明的优点在于底物特异性高,底物黄芪甲苷全部转化,步骤简单,条件温和,成本低,是温和的生物制备方法,对环境无污染,适合工业化生产。

    一种利用两步酶解法转化黄芪甲苷制备环黄芪醇的方法

    公开(公告)号:CN107058445A

    公开(公告)日:2017-08-18

    申请号:CN201710319796.0

    申请日:2017-05-09

    Inventor: 袁其朋 程磊雨

    Abstract: 本发明公开了一种利用两步酶解法转化黄芪甲苷制备环黄芪醇的方法。具体涉及一种以黄芪甲苷为底物,利用两种不同的水解酶分别水解断裂黄芪甲苷C3位置的β‑木糖苷键和C6位置的β‑葡萄糖苷键而得到黄芪甲苷的苷元环黄芪醇,后经萃取、硅胶柱层析以及乙醇重结晶纯化得到纯度95%以上的环黄芪醇产品。本发明解决了化学法制备环黄芪醇过程中黄芪甲苷的三元环结构的破坏而导致的大量副产物的产生的问题以及克服了传统环黄芪醇制备方法中底物转化率低、步骤繁琐、污染环境等不足。而本发明的优点在于底物特异性高,底物黄芪甲苷全部转化,步骤简单,条件温和,成本低,是温和的生物制备方法,对环境无污染,适合工业化生产。

    一种α-L-鼠李糖苷酶、其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN113584000B

    公开(公告)日:2024-05-28

    申请号:CN202110019047.2

    申请日:2021-01-07

    Abstract: 本发明公开了一种α‑L‑鼠李糖苷酶、其制备方法和应用,属于基因工程和生物催化领域。具体涉及一种新型α‑L‑鼠李糖苷酶氨基酸序列和编码基因、含有上述基因的重组载体和重组微生物、利用上述重组微生物发酵制备α‑L‑鼠李糖苷酶的方法以及所述α‑L‑鼠李糖苷酶在水解薯蓣皂苷制备薯蓣皂素中的应用。本发明提供的α‑L‑鼠李糖苷酶可以特异性水解植物黄姜中甾体皂苷C3位置外侧α‑L‑1,2‑鼠李糖苷键,具有催化效率高、热稳定性好、糖耐受性高等优点。此外,在所述α‑L‑鼠李糖苷酶和β‑D‑葡萄糖苷酶的共催化下,黄姜粗提物中的甾体皂苷几乎完全转化为薯蓣皂素,转化率高达98.5%,表明其在规模化皂素生产中具有良好的应用前景。

    一种α-L-鼠李糖苷酶及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN113584002A

    公开(公告)日:2021-11-02

    申请号:CN202110019051.9

    申请日:2021-01-07

    Abstract: 本发明公开了一种新型α‑L‑鼠李糖苷酶及其制备方法和应用,属于基因工程和生物催化领域。具体涉及一种新型的α‑L‑鼠李糖苷酶及其氨基酸序列、编码上述氨基酸序列的核苷酸序列、含有上述核苷酸序列的重组载体和重组细胞、利用上述重组细胞制备α‑L‑鼠李糖苷酶的方法以及上述α‑L‑鼠李糖苷酶在阿可拉定生产中的应用。本发明所提供的α‑L‑鼠李糖苷酶可以高效逐步水解断裂朝藿定C外侧和内侧鼠李糖苷键。在α‑L‑鼠李糖苷酶和β‑D‑葡萄糖苷酶的共同催化下,底物朝藿定C几乎全部转化为阿可拉定,转化率高达99%以上、无副产物、步骤简单、反应时间短、且污染小。

    一种生物法转化制备薯蓣皂素的方法

    公开(公告)号:CN112575050A

    公开(公告)日:2021-03-30

    申请号:CN202010926755.X

    申请日:2020-09-07

    Abstract: 一种生物法转化制备薯蓣皂素的方法,属于天然产物的生物转化以及生产技术领域。具体涉及一种以薯蓣皂苷粗提物为底物,先利用疣胞漆斑菌(Myrothecium verrucaria CGMCC NO.3.0781)发酵制备的鼠李糖苷酶粗酶液催化水解断裂底物中薯蓣皂苷C3位置外侧的鼠李糖苷键,继而再使用纤维素酶水解薯蓣皂苷C3位置残留的葡萄糖苷键得到终产物薯蓣皂素。本发明是利用两步酶催化法转化薯蓣皂苷粗提物制备薯蓣皂素,其特点在于底物中薯蓣皂苷的转化率高达99%、无副产物、方法简单易行、条件温和,对设备要求低、对环境无污染、适合工业化生产。

    炭黑曲霉转化黄芪甲苷制备6-O-葡萄糖-环黄芪醇的方法

    公开(公告)号:CN107034261B

    公开(公告)日:2020-09-04

    申请号:CN201710311302.4

    申请日:2017-05-05

    Inventor: 袁其朋 程磊雨

    Abstract: 本发明公开了炭黑曲霉转化黄芪甲苷制备6‑O‑葡萄糖‑环黄芪醇的方法,具体涉及一种利用炭黑曲霉(Aspergillus carbonarius.CICC 41254)在适量黄芪粉为诱导物的前提下,以黄芪甲苷为底物发酵转化制得6‑O‑葡萄糖‑环黄芪醇,并将发酵所得发酵液经水饱和正丁醇萃取、硅胶柱层析以及乙醇重结晶,最终得到纯度达到95%以上的6‑O‑葡萄糖‑环黄芪醇产品。本发明是利用微生物转化法制备6‑O‑葡萄糖‑环黄芪醇,其特点在于底物黄芪甲苷几乎全部转化,转化率高,方法简单易行,成本低,且对环境无污染,适合工业化生产。

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