公开(公告)号：CN118222468A

公开(公告)日：2024-06-21

申请号：CN202410280384.0

申请日：2024-03-12

Applicant: 北京化工大学

Inventor： 孙新晓 ,  袁其朋 ,  蒋可 ,  申晓林 ,  王佳

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N15/61 ,  C12N15/55 ,  C12N15/31 ,  C12P7/02 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明构建了一种能稳定遗传的生物合成肌醇的基因工程菌株。其特征在于：以敲除了使葡萄糖进入糖酵解和磷酸戊糖途径相关基因、使磷酸烯醇式丙酮酸转化为丙酮酸相关基因、进入三羧酸循环路径相关基因的菌株作为底盘菌，通过CRISPR/Cas9技术在宿主内用强启动子、多拷贝整合肌醇合成途径中的肌醇‑1‑磷酸合成酶基因、肌醇单磷酸酶基因至底盘菌的基因组上，使其具有单一稳定的染色体，不含质粒或其他游离DNA载体。同时，敲除了宿主中的甘油分解代谢基因、过表达来自抗辐射奇异球菌的全局调控因子，提升生产菌株的生长特性和生产稳定性。本发明既能实现实现肌醇的高产，又能摆脱应用质粒对工程菌生产造成不稳定的影响，对肌醇的工业化生产极具有应用前景。