一种多探针检测MGMT基因启动子DMR2区域甲基化位点的试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN111440852B

    公开(公告)日:2021-02-26

    申请号:CN201911139568.0

    申请日:2019-11-20

    IPC分类号: C12Q1/6858 C12N15/11

    摘要: 本发明提供了一种多探针检测MGMT基因启动子DMR2区域甲基化位点的试剂盒及方法。试剂盒包括:用于检测MGMT启动子DMR2区域的2对引物对和5条探针的混合物、数字PCR预混液、荧光素酶、ddH2O和校准文件。本发明所述试剂盒及方法通过使用针对MGMT基因设计的简并引物对基因MGMT启动子DMR2区域进行扩增,并且通过使用多条探针同时检测MGMT基因启动子DMR2区域中全部16个CpG岛富集区域,并通过引入校准文件进行荧光信号的校准,避免了样本CpG岛富集区域甲基化状态不同造成的假阴性结果,大大提高了检测准确度以及检出率。

    一种人EGFR基因四重多位点突变检测试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN107723213B

    公开(公告)日:2018-07-13

    申请号:CN201711212624.X

    申请日:2017-11-28

    IPC分类号: C12M1/00 C12Q1/6858

    摘要: 本发明一种人EGFR基因四重多位点突变检测试剂盒及方法是基于三荧光通道数字PCR方法设计的精准检测人EGFR基因突变位点的试剂盒。本试剂盒及方法利用特异的TAQMAN探针,针对EGFR基因L858R、L861Q、E19缺失和T790M四重突变区域,在单管反应液中同时检测涉及EGFR‑TKI药敏和耐药的共22个突变位点,并且可以根据突变DNA的拷贝数判定模板类型。针对人EGFR基因19号外显子缺失突变,本试剂盒及方法还包括一种特异修饰的阻遏核苷酸探针,其可以与野生型DNA结合,从而确保检测到的荧光微珠均为突变DNA的信号,之后再根据突变DNA的拷贝数判定模板的类型。本发明中涉及到的试剂盒及方法克服了以往EGFR基因突变检测中繁琐和灵敏度低等问题,大大提高了人EGFR基因突变检测的稳定性、特异性和灵敏度。

    一种多探针检测MGMT基因启动子DMR2区域甲基化位点的试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN111440852A

    公开(公告)日:2020-07-24

    申请号:CN201911139568.0

    申请日:2019-11-20

    IPC分类号: C12Q1/6858 C12N15/11

    摘要: 本发明提供了一种多探针检测MGMT基因启动子DMR2区域甲基化位点的试剂盒及方法。试剂盒包括:用于检测MGMT启动子DMR2区域的2对引物对和5条探针的混合物、数字PCR预混液、荧光素酶、ddH2O和校准文件。本发明所述试剂盒及方法通过使用针对MGMT基因设计的简并引物对基因MGMT启动子DMR2区域进行扩增,并且通过使用多条探针同时检测MGMT基因启动子DMR2区域中全部16个CpG岛富集区域,并通过引入校准文件进行荧光信号的校准,避免了样本CpG岛富集区域甲基化状态不同造成的假阴性结果,大大提高了检测准确度以及检出率。

    一种蛋白质免疫印迹膜再生液

    公开(公告)号:CN107271656B

    公开(公告)日:2018-06-01

    申请号:CN201610220212.X

    申请日:2016-04-08

    IPC分类号: G01N33/53

    摘要: 本发明属于分子生物学领域,主要涉及到一种蛋白质免疫印迹膜的再生液。此蛋白质免疫印迹膜再生液可以高效去除免疫印迹膜上的一抗和二抗,以便用于蛋白免疫印迹检测中转移了蛋白的同一张印迹膜的重复高效利用,可以非常方便地重新利用使用过的印迹膜检测其它目的蛋白,省时省力,而且可以消除蛋白重新上样而带来的误差,使可比性增强。经过多个抗体的检测实验,这种蛋白质免疫印迹膜再生液通常可以重复利用免疫印迹膜至少三次,大大节省了分子生物学常规实验蛋白质免疫印迹检测所消耗的相关费用,并且使用本试剂只需大约30分钟即可实现蛋白免疫印迹膜的重复再使用。并与底物显色法、化学发光显色、荧光标记二抗的直接检测法兼容。

    一种从少量粮油中提取DNA的方法

    公开(公告)号:CN107267496A

    公开(公告)日:2017-10-20

    申请号:CN201610220213.4

    申请日:2016-04-08

    IPC分类号: C12N15/10

    CPC分类号: C12N15/101 C12Q2523/308

    摘要: 本发明所述的是一种从粮油中低成本、低起始量、吸附柱式提取DNA的方法,其是在1.5mL或50mL离心管中用水、缓冲液或正己烷多次循环萃取出粮油中的DNA,然后用离心式吸附柱收集、纯化DNA。本发明提取的DNA相对浓度较高,便于后续的收集、纯化。本发明适宜于不同规模的实验室或检测中心从DNA含量稀少的粮油中提取DNA。应用该方法提取到的DNA,可以进行PCR扩增、转基因成分检测、物种检测等。