公开(公告)号：CN117802049A

公开(公告)日：2024-04-02

申请号：CN202311859508.2

申请日：2023-12-30

申请人： 北京银丰鼎诚生物工程技术有限公司 ,  银丰生物工程集团有限公司

发明人： 李瑞 ,  周莹 ,  陈小威 ,  杨玉翠 ,  杨敏 ,  张换红 ,  张紫瑞

IPC分类号： C12N5/10 ,  C12N5/0797 ,  C12N15/62 ,  C12N15/86 ,  C12R1/91

摘要： 本发明公开了一种可逆永生化人源神经干细胞系的制备方法，包括以下步骤：(1)构建含有目的基因的重组病毒载体，得到含永生化融合基因的病毒；所述目的基因为c‑Myc基因、linker和ESR1羧基端截短体突变体基因的融合基因；所述ESR1羧基端截短体突变体为G521R单点突变体或G400V/M543A/L544A三点突变体；(2)利用病毒转导和筛选构建可逆永生化人神经干细胞系，通过添加或去除雌激素受体调节剂来诱导细胞永生化与去永生化。本发明所获得的永生化神经干细胞在体外培养中能自我更新和无限扩增，治疗基因易在细胞内稳定表达，并仍然具有多潜能特征。本发明对神经干细胞的研究具有重要意义。