公开(公告)号：CN107058138A

公开(公告)日：2017-08-18

申请号：CN201710024379.3

申请日：2017-01-13

Applicant: 华东师范大学

Inventor： 朱品宽 ,  曲耀 ,  卢正宇 ,  黄丽 ,  王奕文 ,  倪兵 ,  许玲

IPC: C12N1/15 ,  C12N1/06 ,  C12N15/31 ,  C12P23/00 ,  C12Q1/68 ,  C12R1/77

CPC classification number: C07K14/37 ,  C12N1/06 ,  C12P23/00 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q2563/107 ,  C12Q2531/113 ,  C12Q2521/107

Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种光诱导型高产类胡萝卜素的镰刀菌基因工程菌株的构建方法，所用背景菌株为亚洲型禾谷镰刀菌，对亚洲型禾谷镰刀菌中的一个小的LOV结构域蛋白编码基因Favvd进行敲除，获得能持续进行光响应的突变菌株。主要包括如下步骤：利用同源重组片段构建法，将目的基因Favvd的5'‑UTR和3'‑UTR分别与潮霉素基因Hph的上下游编码区融合，获得上下游融合片段，利用PEG介导的原生质体转化法将融合片段转入野生型的原生质体中进行双交换同源重组，通过筛选鉴定获得在光诱导条件下高产类胡萝卜素的突变菌株ΔFavvd。该菌株产类胡萝卜素的效率显著提升，能持续响应光信号，具有培养简单，生长速度快，产率高的优点。