单细胞DNA损伤的快速检测方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN113405881A

    公开(公告)日:2021-09-17

    申请号:CN202110645348.6

    申请日:2021-06-10

    摘要: 本发明公开了一种单细胞DNA损伤的快速检测方法及试剂盒,包括A、铺胶,电泳载玻片在75%乙醇中清洗擦干后铺第一层胶,铺胶前将载玻片在火焰上烤一遍,在受炙面一端滴加普通琼脂糖凝胶0.1~0.3mL,用涂布棒水平铺拉凝胶到另一端,然后烤干,备用;而后铺第二层胶:取30~50μL细胞悬液与150~250μL 1%低熔点琼脂糖凝胶吹打混匀,再取混合液滴在铺有底胶载玻片的一侧,用盖玻片从有胶的一侧缓缓放下,而后移去盖玻片;B、裂解、解旋,细胞裂解液的配制方法如下:称量Tris0.12~0.15g、NaOH 0.8~1.0g、NaCl 14.5~15.0g、Na2EDTA 3.72~4.0g置于烧杯中,加入80mL去离子水并用玻璃棒搅拌均匀使其完全溶解,调pH至10后定容至100ml,存放于4℃条件待用,用前加入曲拉通100和二甲基亚砜,终浓度均为1%;C、电泳、染色及分析。