一种吗啉代寡核苷酸分子(VMO)有效转染鸡胚的方法

    公开(公告)号:CN114457120A

    公开(公告)日:2022-05-10

    申请号:CN202111335855.6

    申请日:2021-11-08

    IPC分类号: C12N15/873 C12N15/89

    摘要: 本发明公开了一种吗啉代寡核苷酸分子(VMO)有效转染鸡胚的方法,属于生物技术领域,具体步骤包括对孵化至第3天的胚蛋在无菌条件下进行赤道面开窗,选择存活状态良好的鸡胚;用显微注射仪的玻璃针将稀释的吗啉代寡核苷酸分子溶液(2μL,1μg/μL)注射到鸡胚卵黄囊血管;用医用胶带封口后放入孵化箱中继续孵化,观察胚胎存活率,并根据下一步要求进行转染效果检测。通过本发明建立了一种通过血管注射的方式成功地使吗啉代寡核苷酸分子在鸡胚体内发挥作用,可用于鸡胚外源基因敲低功能的研究。

    应用多重PCR鉴定鸡胚盘性别的方法

    公开(公告)号:CN101130816B

    公开(公告)日:2011-06-01

    申请号:CN200710052846.X

    申请日:2007-07-27

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明属于动物繁殖技术领域,具体地,本发明属于一种家禽性别鉴定技术领域,具体涉及一种多重PCR鉴定鸡胚盘性别的方法。其步骤包括:1)根据GenBank登录号为D85614的鸡EE0.6序列设计两对嵌套式引物,并根据GenBank登录号为NC_006089鸡wisp1基因设计两对嵌套式引物作为内部对照;2)提取已知性别的鸡血样基因组DNA,进行引物特异性检验,然后提取待测的鸡胚盘细胞DNA进行PCR扩增,根据扩增的DNA片段大小鉴定鸡胚盘性别,当扩增的DNA片段为500bp的一条带即判定该胚胎为雄性,当扩增的DNA片段为500bp和246bp的两条带则判定该胚胎为雌性。本发明还公开了扩增所用的引物的序列。

    鸡快慢羽分子鉴定方法
    4.
    发明公开

    公开(公告)号:CN101619354A

    公开(公告)日:2010-01-06

    申请号:CN200910062895.0

    申请日:2009-07-02

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明属于动物育种技术领域,具体涉及一种应用双重PCR进行鸡快羽和慢羽鉴定的方法。其步骤包括:1)利用在鸡Z染色体上找到的K基因位点相关序列,根据快慢羽等位基因的结构设计两对引物;2)提取已知快慢羽的鸡血样DNA,进行引物特异性实验,根据扩增DNA片段大小和有无来鉴定鸡是快羽还是慢羽。当只扩增出一条350bp带,判定该鸡为快羽型;当扩增出两条带350bp和909bp,确定为慢羽型。本发明还公开对本方法的可靠性验证,并将本方法应用到快慢羽自别雌雄配套系的培育过程。本发明可以缩短快慢羽自别雌雄配套系培育时间,节省培育成本。

    一种鸡隐性白羽基因的分子鉴定方法

    公开(公告)号:CN101696452B

    公开(公告)日:2011-12-28

    申请号:CN200910272411.5

    申请日:2009-10-19

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明属于鸡分子标记制备技术领域。具体涉及鸡隐性白羽基因的分子鉴定方法。建立了一种鸡隐性白羽基因分子鉴定方法,利用鸡隐性白羽控制基因(插入逆转录病毒的TYR基因)和有色羽控制基因TYR基因的核苷酸序列分别设计了引物对1和引物对2,其中引物对1用于检测隐性白羽等位基因,引物对2用于检测有色羽等位基因。方法是:提取待鉴定鸡的基因组DNA,用引物对1和引物对2做PCR扩增;电泳检测扩增产物;根据电泳结果判断鸡的羽色基因型:若只有引物对1扩增出产物,则为隐性白羽纯合子(表型为白羽);若只有引物对2扩增出产物,则是非隐性白羽纯合子(表型可能为有色或白羽);若两对引物均能扩增出产物,则是隐性白羽杂合子(表型可能为有色或白羽)。本发明为鸡隐性白羽基因型鉴定提供了一种快捷的方法。

    一种鸡隐性白羽基因的分子鉴定方法

    公开(公告)号:CN101696452A

    公开(公告)日:2010-04-21

    申请号:CN200910272411.5

    申请日:2009-10-19

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明属于鸡分子标记制备技术领域。具体涉及鸡隐性白羽基因的分子鉴定方法。建立了一种鸡隐性白羽基因分子鉴定方法,利用鸡隐性白羽控制基因(插入逆转录病毒的TYR基因)和有色羽控制基因TYR基因的核苷酸序列分别设计了引物对1和引物对2,其中引物对1用于检测隐性白羽等位基因,引物对2用于检测有色羽等位基因。方法是:提取待鉴定鸡的基因组DNA,用引物对1和引物对2做PCR扩增;电泳检测扩增产物;根据电泳结果判断鸡的羽色基因型:若只有引物对1扩增出产物,则为隐性白羽纯合子(表型为白羽);若只有引物对2扩增出产物,则是非隐性白羽纯合子(表型可能为有色或白羽);若两对引物均能扩增出产物,则是隐性白羽杂合子(表型可能为有色或白羽)。本发明为鸡隐性白羽基因型鉴定提供了一种快捷的方法。

    应用多重PCR鉴定鸡胚盘性别的方法

    公开(公告)号:CN101130816A

    公开(公告)日:2008-02-27

    申请号:CN200710052846.X

    申请日:2007-07-27

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明属于动物繁殖技术领域,具体地,本发明属于一种家禽性别鉴定技术领域,具体涉及一种多重PCR鉴定鸡胚盘性别的方法。其步骤包括:1)根据GenBank登录号为D85614的鸡EE0.6序列设计两对嵌套式引物,并根据GenBank登录号为NC 006089鸡wisp1基因设计两对嵌套式引物作为内部对照;2)提取已知性别的鸡血样基因组DNA,进行引物特异性检验,然后提取待测的鸡胚盘细胞DNA进行PCR扩增,根据扩增的DNA片段大小鉴定鸡胚盘性别,当扩增的DNA片段为500bp的一条带即判定该胚胎为雄性,当扩增的DNA片段为500bp和246bp的两条带则判定该胚胎为雌性。本发明还公开了扩增所用的引物的序列。