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公开(公告)号:CN103951630B
公开(公告)日:2016-06-01
申请号:CN201410154388.0
申请日:2014-04-17
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07D263/26 , C07K14/765 , C07K14/795 , C07K14/77 , G01N33/544
Abstract: 本发明公开了一种直接检测呋喃它酮代谢物AMOZ的树状半抗原、树状抗原及其应用。树状半抗原是将AMOZ的乙醛酸衍生物偶联在四分支聚酰胺-胺的活性氨基末端得到,基于该树状半抗原制备人工抗原,再以人工抗原制备抗体。通过本发明的人工抗原能够获得直接针对AMOZ的高质量抗体,抗体的效价为1:64000,基于该抗体所建立的化学发光酶联免疫分析方法(CLEIA)对AMOZ的最低检测限为0.112 ng/mL,半抑制浓度为15.26 ng/mL,可以直接用于AMOZ的检测,克服了传统方案的AMOZ半抗原、人工抗原制备出的抗体特异性差,不能直接识别AMOZ本身的缺点。本发明的树状半抗原、人工抗原及抗体在食品中AMOZ的残留检测上具有广泛的应用前景,同时该半抗原的制备思路可以为其他类似的小分子化合物的半抗原设计提供借鉴。
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公开(公告)号:CN105801512B
公开(公告)日:2019-04-12
申请号:CN201610207332.6
申请日:2016-04-01
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07D263/26 , C07C323/31 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K14/795 , G01N33/577 , G01N33/531 , G01N21/78 , G01N21/31
Abstract: 本发明提供了一种同时检测呋喃它酮代谢物(AMOZ)、孔雀石绿(MG)及隐孔雀石绿(LMG)的免疫检测方法。本发明科学合成AMOZ半抗原和LMG半抗原,将其分别与载体蛋白偶联制备人工抗原。利用AMOZ人工抗原和LMG人工抗原,分别制备针对两种对象的杂交瘤细胞株,采用杂交‑杂交瘤技术制备分泌同时抗AMOZ和LMG的双特异性抗体,并成功建立多残留免疫检测方法,实现对AMOZ、MG及LMG的同时检测,对AMOZ的检测限为0.1 ng/mL,半抑制浓度为1.3 ng/mL,对LMG的检测限为4.8 ng/mL,半抑制浓度为45.3 ng/mL。本发明方法特异性强,灵敏度较高,操作方法简便,在食品中AMOZ、MG及LMG的多残留检测方面具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN103954749B
公开(公告)日:2015-11-11
申请号:CN201410154389.5
申请日:2014-04-17
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/53 , C07K14/795 , C07K14/77 , C07K14/765 , C07K16/44
Abstract: 本发明公开了一种用于直接检测呋喃它酮代谢物AMOZ的快速免疫检测方法,包括AMOZ半抗原、人工抗原、抗体等的制备及其应用。所述AMOZ半抗原具有式(Ⅰ)或式(Ⅱ)所示分子结构,所述AMOZ人工抗原具有式(Ⅲ)或式(Ⅳ)所示分子结构。采用本发明抗原得到的抗体可以特异性识别AMOZ,抗体的效价为1:64000,最低检测限为0.852ng/mL,半抑制浓度为15.26ng/mL,可以直接用于AMOZ的检测,克服传统酶联免疫方法需要对AMOZ进行衍生化的特点,更简便、快速及低成本。本发明的抗原及抗体在食品中AMOZ的残留检测上具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN103954749A
公开(公告)日:2014-07-30
申请号:CN201410154389.5
申请日:2014-04-17
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/53 , C07K14/795 , C07K14/77 , C07K14/765 , C07K16/44
CPC classification number: G01N33/566 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K14/795 , C07K16/44 , C07K19/00
Abstract: 本发明公开了一种用于直接检测呋喃它酮代谢物AMOZ的快速免疫检测方法,包括AMOZ半抗原、人工抗原、抗体等的制备及其应用。所述AMOZ半抗原具有式(Ⅰ)或式(Ⅱ)所示分子结构,所述AMOZ人工抗原具有式(Ⅲ)或式(Ⅳ)所示分子结构。采用本发明抗原得到的抗体可以特异性识别AMOZ,抗体的效价为1:64000,最低检测限为0.852ng/mL,半抑制浓度为15.26ng/mL,可以直接用于AMOZ的检测,克服传统酶联免疫方法需要对AMOZ进行衍生化的特点,更简便、快速及低成本。本发明的抗原及抗体在食品中AMOZ的残留检测上具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN103951630A
公开(公告)日:2014-07-30
申请号:CN201410154388.0
申请日:2014-04-17
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07D263/26 , C07K14/765 , C07K14/795 , C07K14/77 , G01N33/544
CPC classification number: C07D263/26 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K14/795 , C07K19/00 , G01N33/53 , G01N33/531
Abstract: 本发明公开了一种直接检测呋喃它酮代谢物AMOZ的树状半抗原、树状抗原及其应用。树状半抗原是将AMOZ的乙醛酸衍生物偶联在四分支聚酰胺-胺的活性氨基末端得到,基于该树状半抗原制备人工抗原,再以人工抗原制备抗体。通过本发明的人工抗原能够获得直接针对AMOZ的高质量抗体,抗体的效价为1:64000,基于该抗体所建立的化学发光酶联免疫分析方法(CLEIA)对AMOZ的最低检测限为0.112ng/mL,半抑制浓度为15.26ng/mL,可以直接用于AMOZ的检测,克服了传统方案的AMOZ半抗原、人工抗原制备出的抗体特异性差,不能直接识别AMOZ本身的缺点。本发明的树状半抗原、人工抗原及抗体在食品中AMOZ的残留检测上具有广泛的应用前景,同时该半抗原的制备思路可以为其他类似的小分子化合物的半抗原设计提供借鉴。
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公开(公告)号:CN105801512A
公开(公告)日:2016-07-27
申请号:CN201610207332.6
申请日:2016-04-01
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07D263/26 , C07C323/31 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K14/795 , G01N33/577 , G01N33/531 , G01N21/78 , G01N21/31
CPC classification number: C07D263/26 , C07C323/31 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K14/795 , C07K19/00 , G01N21/31 , G01N21/78 , G01N33/531 , G01N33/577
Abstract: 本发明提供了一种同时检测呋喃它酮代谢物(AMOZ)、孔雀石绿(MG)及隐孔雀石绿(LMG)的免疫检测方法。本发明科学合成AMOZ半抗原和LMG半抗原,将其分别与载体蛋白偶联制备人工抗原。利用AMOZ人工抗原和LMG人工抗原,分别制备针对两种对象的杂交瘤细胞株,采用杂交?杂交瘤技术制备分泌同时抗AMOZ和LMG的双特异性抗体,并成功建立多残留免疫检测方法,实现对AMOZ、MG及LMG的同时检测,对AMOZ的检测限为0.1 ng/mL,半抑制浓度为1.3 ng/mL,对LMG的检测限为4.8 ng/mL,半抑制浓度为45.3 ng/mL。本发明方法特异性强,灵敏度较高,操作方法简便,在食品中AMOZ、MG及LMG的多残留检测方面具有广泛的应用前景。
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