公开(公告)号：CN113186187A

公开(公告)日：2021-07-30

申请号：CN202110386494.1

申请日：2021-04-12

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 任涛 ,  张殿宸 ,  梁健鹏 ,  向斌 ,  林秋燕

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/12 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开了一种基于CRSIPR技术构建14‑3‑3ε基因敲除细胞株的方法及其应用，属于生物技术领域。本发明提供一种敲除14‑3‑3ε基因的sgRNA序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明利用CRISPR‑Cas9技术首次在鸡成纤维细胞系DF‑1细胞基因组上敲除14‑3‑3ε基因，使得14‑3‑3ε蛋白的表达完全丧失，获得14‑3‑3ε敲除的DF‑1细胞株，且敲除细胞株活性、生长速度等方面均与对照细胞无明显差异，是较为理想的DF‑1敲除的细胞模型；操作简便，周期短，成本低，改造后细胞株稳定，可用于研究14‑3‑3ε蛋白的生物学功能。

公开(公告)号：CN113186187B

公开(公告)日：2023-03-17

申请号：CN202110386494.1

申请日：2021-04-12

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 任涛 ,  张殿宸 ,  梁健鹏 ,  向斌 ,  林秋燕

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/12 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开了一种基于CRSIPR技术构建14‑3‑3ε基因敲除细胞株的方法及其应用，属于生物技术领域。本发明提供一种敲除14‑3‑3ε基因的sgRNA序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明利用CRISPR‑Cas9技术首次在鸡成纤维细胞系DF‑1细胞基因组上敲除14‑3‑3ε基因，使得14‑3‑3ε蛋白的表达完全丧失，获得14‑3‑3ε敲除的DF‑1细胞株，且敲除细胞株活性、生长速度等方面均与对照细胞无明显差异，是较为理想的DF‑1敲除的细胞模型；操作简便，周期短，成本低，改造后细胞株稳定，可用于研究14‑3‑3ε蛋白的生物学功能。