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公开(公告)号：CN116377600A
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202310149018.7
申请日：2023-02-22
Applicant: 华南农业大学
IPC: C40B50/06 , C40B40/08 , C12Q1/6806
Abstract: 本发明属于生物基因检测技术领域，公开了一种用于挖掘新型耐药基因的高库容功能宏基因组文库的构建方法及应用；针对插入片段钝化后的平末端与载体的平末端连接效率低问题，使用T4多聚核苷酸激酶；针对载体模板残留问题，使用DpnI限制性内切酶进行模板消化；针对载体自我连接问题，用小牛肠碱性磷酸酶(CIP)处理线性载体DNA。本发明方法所得功能基因组文库的平均插入片段大小为7kbp，范围为5至8kbp，总文库大小为10.25Gbp。插入频率范围89％至96％，库容比报道的使用pZE21MCS表达载体的任何功能宏基因组文库大近1个数量级。
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