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公开(公告)号:CN110791591B
公开(公告)日:2023-06-23
申请号:CN201911127959.0
申请日:2019-11-18
Applicant: 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与CD2V和360‑505R双基因缺失疫苗株LAMP检测引物及其LAMP检测试剂盒,所述检测引物包括两套引物,一套引物针对非洲猪瘟病毒野毒株的CD2v序列,能特异性检测非洲猪瘟病毒野毒株;另一套针对双基因缺失疫苗株,引物的位置在于360‑505R基因27942‑35500位缺失区两侧,能特异性的检测出该非洲猪瘟疫苗株。该检测方法采用恒温反应的检测手段,仅需加热即可实现整个反应,可以实现快速现场检测,所述方法检测灵敏度高、特异性强、重复性好、检测速度快,可以作为有效的非洲猪瘟病毒野毒株与CD2v和360‑505R双基因缺失疫苗株的的基层检测手段。
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公开(公告)号:CN110777220A
公开(公告)日:2020-02-11
申请号:CN201911129895.8
申请日:2019-11-18
Applicant: 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q1/6804 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于病毒株鉴别方法技术领域,具体为一种用于检测非洲猪瘟病毒野毒株的引物组和探针,包括第一引物组和第一探针;所述第一引物组中的上游引物如序列SEQ ID NO:1所示;所述第一引物组中的下游引物为5’端带有生物素的如序列SEQ ID NO:2所示的DNA分子;所述第一探针为5’端带有羧基荧光素、3’端带有C3-spacer基团的如序列SEQ ID NO:3所示的DNA分子。同时,还提供了一种用于检测MGF360-505R基因缺失株的引物组和探针;该引物组和探针组特异性强、灵敏度高,同时,本发明还提出了基于RPA-LFD技术和上述引物组和探针组的RPA试纸条试剂盒和鉴别方法。
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公开(公告)号:CN111074000B
公开(公告)日:2023-08-22
申请号:CN201911127987.2
申请日:2019-11-18
Applicant: 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与CD2V和/或360‑505R基因缺失株的三重荧光定量PCR检测材料及试剂盒,检测材料包括引物和探针,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1~9所示。本发明利用三组引物探针进行三重荧光定量PCR扩增非洲猪瘟病毒P72、CD2V和360‑505R基因,减少了鉴定不同基因的检测成本和检测时间;可以辨别毒株是否存在基因的缺失,且具有良好的特异性及灵敏度。对于传统qPCR,每次仅扩增一个基因来说,本发明每次PCR反应同时扩增3个基因,成本降低了约2/3。
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公开(公告)号:CN110804677A
公开(公告)日:2020-02-18
申请号:CN201910973936.5
申请日:2019-10-14
Applicant: 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6848 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与CD2V和/或360-505R基因缺失株的巢式二重PCR检测引物及试剂盒,八对检测引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:1~8所示。本发明利用8对引物巢式二重扩增非洲猪瘟病毒CD2V和360-505R基因,减少了鉴定不同基因的检测成本和检测时间;可以辨别毒株是否存在基因的缺失,以及是否存在混合感染。对于传统巢式PCR,每次仅扩增一个基因来说,本发明每次PCR反应同时扩增两个基因,成本降低了约1/2;对于普通二重PCR来说,本发明灵敏度提高1010个数量级以上,可达1×10-18ng/μL,具有广阔的市场前景。
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公开(公告)号:CN111074000A
公开(公告)日:2020-04-28
申请号:CN201911127987.2
申请日:2019-11-18
Applicant: 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与CD2V和/或360-505R基因缺失株的三重荧光定量PCR检测材料及试剂盒,检测材料包括引物和探针,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1~9所示。本发明利用三组引物探针进行三重荧光定量PCR扩增非洲猪瘟病毒P72、CD2V和360-505R基因,减少了鉴定不同基因的检测成本和检测时间;可以辨别毒株是否存在基因的缺失,且具有良好的特异性及灵敏度。对于传统qPCR,每次仅扩增一个基因来说,本发明每次PCR反应同时扩增3个基因,成本降低了约2/3。
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公开(公告)号:CN110791591A
公开(公告)日:2020-02-14
申请号:CN201911127959.0
申请日:2019-11-18
Applicant: 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与CD2V和360-505R双基因缺失疫苗株LAMP检测引物及其LAMP检测试剂盒,所述检测引物包括两套引物,一套引物针对非洲猪瘟病毒野毒株的CD2v序列,能特异性检测非洲猪瘟病毒野毒株;另一套针对双基因缺失疫苗株,引物的位置在于360-505R基因27942-35500位缺失区两侧,能特异性的检测出该非洲猪瘟疫苗株。该检测方法采用恒温反应的检测手段,仅需加热即可实现整个反应,可以实现快速现场检测,所述方法检测灵敏度高、特异性强、重复性好、检测速度快,可以作为有效的非洲猪瘟病毒野毒株与CD2v和360-505R双基因缺失疫苗株的的基层检测手段。
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公开(公告)号:CN110804677B
公开(公告)日:2023-08-22
申请号:CN201910973936.5
申请日:2019-10-14
Applicant: 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6848 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与CD2V和/或360‑505R基因缺失株的巢式二重PCR检测引物及试剂盒,八对检测引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:1~8所示。本发明利用8对引物巢式二重扩增非洲猪瘟病毒CD2V和360‑505R基因,减少了鉴定不同基因的检测成本和检测时间;可以辨别毒株是否存在基因的缺失,以及是否存在混合感染。对于传统巢式PCR,每次仅扩增一个基因来说,本发明每次PCR反应同时扩增两个基因,成本降低了约1/2;对于普通二重PCR来说,本发明灵敏度提高1010个数量级以上,可达1×10‑18ng/μL,具有广阔的市场前景。
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公开(公告)号:CN110777220B
公开(公告)日:2023-08-01
申请号:CN201911129895.8
申请日:2019-11-18
Applicant: 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q1/6804 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于病毒株鉴别方法技术领域,具体为一种用于检测非洲猪瘟病毒野毒株的引物组和探针,包括第一引物组和第一探针;所述第一引物组中的上游引物如序列SEQ ID NO:1所示;所述第一引物组中的下游引物为5’端带有生物素的如序列SEQ ID NO:2所示的DNA分子;所述第一探针为5’端带有羧基荧光素、3’端带有C3‑spacer基团的如序列SEQ ID NO:3所示的DNA分子。同时,还提供了一种用于检测MGF360‑505R基因缺失株的引物组和探针;该引物组和探针组特异性强、灵敏度高,同时,本发明还提出了基于RPA‑LFD技术和上述引物组和探针组的RPA试纸条试剂盒和鉴别方法。
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