公开(公告)号：CN106480094A

公开(公告)日：2017-03-08

申请号：CN201610935108.9

申请日：2016-10-25

申请人： 华南师范大学

发明人： 刘琳 ,  冯启理 ,  万星 ,  张丽丽 ,  郑思春 ,  梁丽宁

IPC分类号： C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12Q1/02

CPC分类号： C12N15/85 ,  C07K14/43563 ,  C12N5/0682 ,  C12N2503/02 ,  C12N2510/00 ,  G01N33/5008 ,  G01N2500/10

摘要： 本发明公开了一种斜纹夜蛾固醇转运蛋白稳定转化的细胞株的制备方法，包括依次进行的以下步骤：步骤1：从斜纹夜蛾克隆SCP-2基因的cDNA；步骤2：把编码SCP-2蛋白的cDNA克隆进入pcDNA5/FRT质粒，形成重组的pcDNA5/FRT-SCP2质粒；步骤3：用该pcDNA5/FRT-SCP2质粒转化大肠杆菌，经培养后获得转化的大肠杆菌；步骤4：从转化的大肠杆菌中提取重组的质粒DNA，并进行纯化；步骤5：用经过纯化的重组pcDNA5/FRT-SCP2质粒DNA转染中国仓鼠卵巢细胞；步骤6：转染后的CHO细胞在含有抗生素hygromycinB的培养基中进行筛选及连续的继代培养即得。本发明的目的在于提供一种斜纹夜蛾固醇转运蛋白稳定转化的细胞株及其制备方法和应用，该细胞株具有筛选精度高、操作简单、结果准确的优势。