一种适用于牛BVDV、IBRV、PIV3、BRSV灭活疫苗的灭活检验方法

    公开(公告)号:CN108152498A

    公开(公告)日:2018-06-12

    申请号:CN201611100655.1

    申请日:2016-12-05

    IPC分类号: G01N33/577 G01N33/569

    CPC分类号: G01N33/56983 G01N33/577

    摘要: 本发明公开了一种适用于牛BVDV、IBRV、PIV3、BRSV灭活疫苗的灭活检验方法。本发明涉及生物医药领域,具体涉及一种针对牛病毒性腹泻病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛副流感病毒、牛呼吸道合胞体病毒灭活疫苗的灭活检验方法,包括以下步骤:1)灭活后的病毒液在适宜细胞上吸附40-60min,期间振摇2-3次;2)吸附后,在细胞转瓶中加入一定体积的细胞维持液继续培养,观察细胞病变,对于无细胞病变的病毒液,收获细胞培养液,并冻融2-3次;3)取冻融后的细胞培养液10-15ml,接种于适宜细胞上吸附,继续培养。进行观察和荧光检测,如没有特异性荧光,则表明灭活完全。本发明中公开的技术方案保证了抗原浓度和病毒感染时间。经本发明灭活检验方法检验病毒的检出率高,可以有效确保灭活疫苗的生物安全。

    牛病毒性腹泻、牛传染性鼻气管炎二联活疫苗及其制备方法

    公开(公告)号:CN112807424A

    公开(公告)日:2021-05-18

    申请号:CN202011120061.3

    申请日:2020-10-19

    摘要: 本发明公开了一种牛病毒性腹泻、牛传染性鼻气管炎二联活疫苗的制备及其应用,属于动物疫苗与兽用生物制品技术领域。该疫苗包含活的牛病毒性腹泻病毒NMM株和牛传染性鼻气管炎病毒JSM株。制备该疫苗的步骤包括,1)两种有效毒株的获得和致弱培养;2)MDBK细胞悬浮培养分别制备病毒抗原;3)以滴度为104.7TCID50的浓度进行配比、分装,添加20%的冻干保护剂后冷冻干燥。所制备牛病毒性腹泻、牛传染性鼻气管炎二联活疫苗病毒滴度在103.5TCID50的浓度下可获得病毒滴度分别为107.3TCID50和107.8TCID50的灭活疫苗同样的免疫效果,超剂量接种安全性评价及效力试验评价结果显示,本发明所述牛病毒性腹泻、牛传染性鼻气管炎二联活疫苗具有低成本、高功效及接种安全的特点。