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    牛病毒性腹泻、牛传染性鼻气管炎二联活疫苗及其制备方法
    1.
    发明公开
    牛病毒性腹泻、牛传染性鼻气管炎二联活疫苗及其制备方法 审中-实审

    公开(公告)号：CN112807424A

    公开(公告)日：2021-05-18

    申请号：CN202011120061.3

    申请日：2020-10-19

    申请人： 华威特(江苏)生物制药有限公司

    发明人： 闫喜军 ,  孟庆森 ,  李真光 ,  和彦良 ,  陈超阳 ,  宋妮 ,  季烨 ,  王宇菲 ,  武华

    IPC分类号： A61K39/295 ,  A61K39/12 ,  A61K39/245 ,  A61P31/14 ,  A61P31/22 ,  C12N7/08

    摘要： 本发明公开了一种牛病毒性腹泻、牛传染性鼻气管炎二联活疫苗的制备及其应用，属于动物疫苗与兽用生物制品技术领域。该疫苗包含活的牛病毒性腹泻病毒NMM株和牛传染性鼻气管炎病毒JSM株。制备该疫苗的步骤包括，1）两种有效毒株的获得和致弱培养；2）MDBK细胞悬浮培养分别制备病毒抗原；3）以滴度为104.7TCID50的浓度进行配比、分装，添加20%的冻干保护剂后冷冻干燥。所制备牛病毒性腹泻、牛传染性鼻气管炎二联活疫苗病毒滴度在103.5TCID50的浓度下可获得病毒滴度分别为107.3TCID50和107.8TCID50的灭活疫苗同样的免疫效果，超剂量接种安全性评价及效力试验评价结果显示，本发明所述牛病毒性腹泻、牛传染性鼻气管炎二联活疫苗具有低成本、高功效及接种安全的特点。

    一种快速驯化贴壁细胞为全悬浮细胞系的方法
    2.
    发明公开
    一种快速驯化贴壁细胞为全悬浮细胞系的方法 无效

    公开(公告)号：CN108865967A

    公开(公告)日：2018-11-23

    申请号：CN201710330836.1

    申请日：2017-05-11

    申请人： 华威特(江苏)生物制药有限公司

    发明人： 关明旭 ,  和彦良 ,  王宇菲 ,  苏玮玮 ,  张树成

    IPC分类号： C12N5/00

    CPC分类号： C12N5/0018 ,  C12N2500/32

    摘要： 本发明公开了一种快速驯化贴壁细胞成为全悬浮细胞系的方法，将低传代健康贴壁细胞直接接种到无血清、无微载体培养基的转瓶中驯化培养；当细胞适应了大于6rpm转瓶机的转速，转到摇瓶中，用新鲜培养基将细胞起始密度调整至5x105细胞/mL，摇瓶转速调整为10‑40rpm；如果4‑5天后细胞密度增长达不到1x106细胞/mL，将细胞离心沉淀后用新鲜无血清、无微载体培养基将细胞密度调整在5x105细胞/mL后继续驯化培养，反复这一驯化步骤直到细胞密度在4‑6天后≥10倍增长，经过10代以上摇瓶传代驯化培养，即可获得全悬浮细胞系，该方法简便，快速，重复性好，成功率高，全悬浮细胞系稳定并且对病毒的感染性不变。