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公开(公告)号：CN113558146A
公开(公告)日：2021-10-29
申请号：CN202010359860.X
申请日：2020-04-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了一种饲料缓冲剂、制备方法和应用以及应用其的饲料，涉及饲料添加剂技术领域，本发明提供的饲料缓冲剂，主要由碳酸氢钠、氧化镁、乙酸钠和丁酸钠组成，碳酸氢钠可以对瘤胃起到酸碱缓冲的效果，维持理想的瘤胃发酵环境；氧化镁可以维持胃肠道内有益生物菌群，增加肠道有益菌的数量；乙酸钠能增加瘤胃中乙酸浓度，提高乳脂率；丁酸钠可以增加反刍动物食欲。本发明提供的饲料缓冲剂通过上述特定组分的配合，不仅能够对反刍动物瘤胃酸中毒起到一定的预防和缓解作用、维持反刍动物肠道内有益菌群的数量，改善机体的健康状态，还可以改善泌乳动物的泌乳性能，改善乳品质，提高乳脂肪、乳糖及乳产量含量，同时还能够增强对乳腺的保护作用。
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公开(公告)号：CN104483275B
公开(公告)日：2017-05-03
申请号：CN201410244414.9
申请日：2014-05-30
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N21/31
Abstract: 本发明属于生物检测领域，涉及一种生物巯化物的检测方法。主要是利用在酸性条件下生物巯化物及显色剂3，3’，5，5’‑四甲基联苯胺竞争与银离子结合，从而抑制银离子引发的显色剂蓝色显色复合物的生成，在波长范围340nm‑780nm进行比色测定，用656nm处的吸收峰进行生物巯化物的检测。该方法在实现生物样本中生物巯化物快速测定的同时，兼具操作简单、成本低廉等优点，适用于血清、细胞裂解液等生物样本中生物巯化物的测定。
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公开(公告)号：CN116027037A
公开(公告)日：2023-04-28
申请号：CN202111251060.7
申请日：2021-10-26
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N33/573 , G01N33/58 , G01N33/543
Abstract: 针对目前尚无检测禽类ACE2检测试剂盒的现状，本发明涉及一种鸡ACE2双抗体夹心ELISA检测试剂盒及检测方法，试剂盒包括：包被有抗鸡ACE2蛋白多克隆抗体的酶标板、封闭液、HRP标记兔抗鸡ACE2多克隆抗体、浓缩洗涤液、显色液、终止液、标准品。本发明鸡ACE2双抗体夹心ELISA检测周期短、操作简便、灵敏度高、特异性强，设备要求简单，能定量分析，且试剂盒可以实现大批量样本的快速检测。ACE2作为RAS系统负调节分子，可降解AngII，发挥抗损伤、抗纤维化等机体保护功能；作为SARS‑CoV‑2功能性受体，具有保护肺损伤的功能；ACE2协同氨基酸转运载体转运，与胃肠道炎症发挥重要作用，因此ACE2含量的微小变化会直接或间接影响动物机体的健康。所以本发明为ACE2的定量提供一种可供选择的检测方法。
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公开(公告)号：CN112266933A
公开(公告)日：2021-01-26
申请号：CN202011135193.3
申请日：2020-10-21
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪ACE2真核表达重组质粒载体的构建、鉴定与表达方法，包括构建ACE2真核表达载体，转染CHO细胞，通过G418筛选出稳定表达的pcDNA.3.1(+)‑ACE2细胞株，获得具有生物学活性的ACE2蛋白。本发明具有：①快速：仅需1小时反应时间；②简单：不受片段酶切位点的影响，无需酶切；③高效：阳性率达95％以上；④无缝：不引入额外序列等优点。ACE2通过靶向降解AngII发挥舒张血管、抑制炎症及抗纤维化等多种机体保护功能；同时作为严重急性呼吸系统综合征冠状病毒(SARS‑CoV)的功能性受体，其临床意义非凡。本发明为深入研究猪ACE2作为潜在的病毒受体在猪冠状病毒感染中发挥的生物学功能及分子机制，开发以ACE2为冠状病毒靶向治疗药物奠定基础。
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公开(公告)号：CN104483275A
公开(公告)日：2015-04-01
申请号：CN201410244414.9
申请日：2014-05-30
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N21/31
Abstract: 本发明属于生物检测领域，涉及一种生物巯化物的检测方法。主要是利用在酸性条件下生物巯化物及显色剂3，3’，5，5’-四甲基联苯胺竞争与银离子结合，从而抑制银离子引发的显色剂蓝色显色复合物的生成，在波长范围340nm-780nm进行比色测定，用656nm处的吸收峰进行生物巯化物的检测。该方法在实现生物样本中生物巯化物快速测定的同时，兼具操作简单、成本低廉等优点，适用于血清、细胞裂解液等生物样本中生物巯化物的测定。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115725505A
公开(公告)日：2023-03-03
申请号：CN202111023250.3
申请日：2021-09-01
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N15/57
Abstract: 本发明提供一株IPEC‑J2细胞ACE2基因敲除稳定株的细胞系及构建方法，包括ACE2基因敲除载体设计、制备、慢病毒包装、单克隆株筛选及敲除分析等并获得ACE2基因敲除稳定细胞系。ACE2在抗炎及纤维化、肠道物质吸收转运及作为SARS‑CoV和SARS‑CoV‑2的功能性受体，调控ACE2对机体健康意义重大。目前未有商品化IPEC‑J2细胞ACE2基因敲除稳定株，在一定程度上限制ACE2在猪肠道健康领域的研究。本发明基于CRISPR/Cas9基因编辑技术成功构建出IPEC‑J2细胞ACE2基因敲除稳定株，为在动物尤其在猪上的研究提供高价值的生物材料，对猪肠道健康的研究具有重要的生物学意义。
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公开(公告)号：CN115308410A
公开(公告)日：2022-11-08
申请号：CN202110492509.2
申请日：2021-05-06
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N33/573 , G01N33/543 , G01N33/68
Abstract: 本发明涉及一种鸭血管紧张素转换酶2(ACE2)双抗体夹心ELISA快速检测试剂盒以及对鸭血管紧张素转换酶2(ACE2)检测方法。本发明具有定量、检测浓度范围大、重复性好、操作简便等优点。
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公开(公告)号：CN112501200A
公开(公告)日：2021-03-16
申请号：CN202011135191.4
申请日：2020-10-21
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种鸡ACE2真核表达重组质粒载体的构建、鉴定与表达方法，包括构建ACE2真核表达载体，转染CHO细胞，筛选稳定表达的pcDNA.3.1(+)‑ACE2细胞株，获得具有生物学活性的ACE2蛋白并测定酶活。本发明具有：①快速：仅需要1小时②简单：无需酶切③高效：阳性率达95％以上④无缝：不引入额外序列等优点。ACE2具有抗炎、抗损伤、抗纤维化等机体保护功能，特别作为SARS‑CoV和SARS‑CoV‑2主要功能性受体，具有保护肺损伤功能。目前缺乏生物活性的鸡ACE2蛋白，限制了其生物学功能的研究。本发明为深入研究鸡ACE2作为病毒受体在禽冠状病毒感染中发挥的生物学功能及其分子机制，开发以ACE2为冠状病毒靶向治疗药物奠定基础。所以本发明无论是从基础研究还是临床运用的意义都是十分重大的。
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公开(公告)号：CN115725506A
公开(公告)日：2023-03-03
申请号：CN202111023466.X
申请日：2021-09-01
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/55 , C12N15/867 , C12N15/65
Abstract: 本发明提供了大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)过表达ACE2细胞株的构建。包括ACE2载体制备、慢病毒包装、单克隆细胞株筛选及过表达鉴定等。建立了可稳定过表达血管紧张素转化酶2(angiotensin‑converting enzyme 2，ACE2)基因的细胞株，并能稳定传代；并对其进行Western blot验证。结果证实过表达的细胞株已经成功将慢病毒携带的ACE2基因整合至大鼠MSC中，且能在MSC中过量稳定表达，ACE2自发现以来，在其抗炎方面的研究报道较多，但在MSC中的研究报道较少，且ACE2联合MSC在抗炎方面的研究几乎未见报道，本发明基于MSC、慢病毒包装等技术首次成功构建出的MSC过表达ACE2稳定株，对ACE2在在各种炎症性疾病的研究及治疗提供了高价值的生物学材料；对包括冠状病毒在内的多种病原所致的炎症性病变的研究具有重要的生物学意义。
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公开(公告)号：CN113969294A
公开(公告)日：2022-01-25
申请号：CN202010727641.2
申请日：2020-07-24
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及可以表达外源鸭ACE2的重组质粒pcDNA3.1‑ACE2的构建以及鉴定，以及CHO细胞G418压力筛选浓度的确定，通过稳定转染将该重组质粒转染进CHO内，在G418压力筛选下，借助免疫荧光及Western‑blot技术构建了可以表达外源ACE2蛋白的重组CHO细胞系。
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