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公开(公告)号：CN112266933A
公开(公告)日：2021-01-26
申请号：CN202011135193.3
申请日：2020-10-21
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪ACE2真核表达重组质粒载体的构建、鉴定与表达方法，包括构建ACE2真核表达载体，转染CHO细胞，通过G418筛选出稳定表达的pcDNA.3.1(+)‑ACE2细胞株，获得具有生物学活性的ACE2蛋白。本发明具有：①快速：仅需1小时反应时间；②简单：不受片段酶切位点的影响，无需酶切；③高效：阳性率达95％以上；④无缝：不引入额外序列等优点。ACE2通过靶向降解AngII发挥舒张血管、抑制炎症及抗纤维化等多种机体保护功能；同时作为严重急性呼吸系统综合征冠状病毒(SARS‑CoV)的功能性受体，其临床意义非凡。本发明为深入研究猪ACE2作为潜在的病毒受体在猪冠状病毒感染中发挥的生物学功能及分子机制，开发以ACE2为冠状病毒靶向治疗药物奠定基础。
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公开(公告)号：CN1613292A
公开(公告)日：2005-05-11
申请号：CN200410065334.3
申请日：2004-11-26
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01G7/06
Abstract: 本发明一种促进果实着色的方法，属于生化试剂在农业生产上的应用，专用于着色型水果如苹果、梨、桃、葡萄等的生产。是通过外施5－氨基乙酰丙酸(5－aminolevulinic acid，ALA)，或者乙酰丙酸(Levulinic acid，LA)，或者谷氨酸(Glutamic acid，Glu)可以明显促进苹果果实果皮花青素的合成，提高果实内可溶性固形物含量，降低苹果可滴定酸含量，从而提高苹果的内外品质和商品性能。该方法可以运用于套袋生产的果树上，也可运用于未套袋的果树上。
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公开(公告)号：CN113122523A
公开(公告)日：2021-07-16
申请号：CN202010049866.7
申请日：2020-01-16
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了鸡ACE2基因的克隆、蛋白的表达和纯化及其多克隆抗体的制备。提供了ACE2蛋白的氨基酸序列和基因序列，构建了ACE2原核表达载体，利用大肠杆菌原核表达系统表达ACE2蛋白，并对蛋白进行纯化。纯化后的蛋白能够制备效价较高的多克隆抗体，并且本发明中的抗原和多克隆抗体可以为进一步开发检测试剂盒奠定基础。ACE2作为RAS系统的负调节分子，通过靶向降解AngII，发挥抗损伤、抗纤维化等机体保护功能；作为急性严重呼吸系统综合征冠状病毒(SARS‑CoV)主要功能性受体，具有保护肺损伤的功能；ACE2协同氨基酸转运载体转运，与氨基酸吸收不良、肠道微生态平衡和胃肠道炎症发挥重要作用。所以本发明无论是从基础研究还是临床运用上的意义都是十分重大的。
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公开(公告)号：CN113121695A
公开(公告)日：2021-07-16
申请号：CN202010047410.7
申请日：2020-01-16
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了麻鸭ACE2基因的克隆、蛋白的表达和纯化及其多克隆抗体的制备。提供了ACE2蛋白的氨基酸序列和基因序列，麻鸭ACE2原核表达载体，利用大肠杆菌原核表达系统表达ACE2蛋白，并对蛋白进行纯化，纯化后的蛋白制备效价较高的多克隆抗体，经测定后该抗体效价为1∶1600，可以用于相关实验。
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公开(公告)号：CN115725505A
公开(公告)日：2023-03-03
申请号：CN202111023250.3
申请日：2021-09-01
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N15/57
Abstract: 本发明提供一株IPEC‑J2细胞ACE2基因敲除稳定株的细胞系及构建方法，包括ACE2基因敲除载体设计、制备、慢病毒包装、单克隆株筛选及敲除分析等并获得ACE2基因敲除稳定细胞系。ACE2在抗炎及纤维化、肠道物质吸收转运及作为SARS‑CoV和SARS‑CoV‑2的功能性受体，调控ACE2对机体健康意义重大。目前未有商品化IPEC‑J2细胞ACE2基因敲除稳定株，在一定程度上限制ACE2在猪肠道健康领域的研究。本发明基于CRISPR/Cas9基因编辑技术成功构建出IPEC‑J2细胞ACE2基因敲除稳定株，为在动物尤其在猪上的研究提供高价值的生物材料，对猪肠道健康的研究具有重要的生物学意义。
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公开(公告)号：CN112501200A
公开(公告)日：2021-03-16
申请号：CN202011135191.4
申请日：2020-10-21
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种鸡ACE2真核表达重组质粒载体的构建、鉴定与表达方法，包括构建ACE2真核表达载体，转染CHO细胞，筛选稳定表达的pcDNA.3.1(+)‑ACE2细胞株，获得具有生物学活性的ACE2蛋白并测定酶活。本发明具有：①快速：仅需要1小时②简单：无需酶切③高效：阳性率达95％以上④无缝：不引入额外序列等优点。ACE2具有抗炎、抗损伤、抗纤维化等机体保护功能，特别作为SARS‑CoV和SARS‑CoV‑2主要功能性受体，具有保护肺损伤功能。目前缺乏生物活性的鸡ACE2蛋白，限制了其生物学功能的研究。本发明为深入研究鸡ACE2作为病毒受体在禽冠状病毒感染中发挥的生物学功能及其分子机制，开发以ACE2为冠状病毒靶向治疗药物奠定基础。所以本发明无论是从基础研究还是临床运用的意义都是十分重大的。
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公开(公告)号：CN1302697C
公开(公告)日：2007-03-07
申请号：CN200410065334.3
申请日：2004-11-26
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01G7/06
Abstract: 本发明涉及一种促进果实着色的方法，属于生化试剂在农业生产上的应用，专用于着色型水果如苹果、梨、桃、葡萄等的生产。是通过外施5-氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinic acid，ALA)，或者乙酰丙酸(Levulinic acid，LA)，或者谷氨酸(Glutamic acid，Glu)可以明显促进苹果果实果皮花青素的合成，提高果实内可溶性固形物含量，降低苹果可滴定酸含量，从而提高苹果的内外品质和商品性能。该方法可以运用于套袋生产的果树上，也可运用于未套袋的果树上。
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公开(公告)号：CN113567671A
公开(公告)日：2021-10-29
申请号：CN202010359917.6
申请日：2020-04-29
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N33/573 , C07K16/40 , C12N15/70
Abstract: 本发明提供了猪ACE2多克隆抗体的制备，构建了ACE2原核表达载体，利用大肠杆菌原核表达系统表达ACE2蛋白，并对蛋白进行纯化。纯化后的蛋白能够制备效价较高的多克隆抗体，并且本发明中的抗原和多克隆抗体可以为进一步开发检测试剂盒奠定基础。ACE2作为RAS系统新的调节因子，通过靶向降解Ang II，发挥舒张血管、抑制炎症及抗纤维化等机体保护功能；作为急性严重呼吸系统综合征冠状病毒(SARS‑CoV)主要功能性受体，具有保护肺损伤的功能；ACE2协同氨基酸转运载体转运，与氨基酸吸收不良、肠道微生态平衡和胃肠道炎症发挥重要作用。所以本发明无论是从基础研究还是临床运用上的意义都是十分重大的。
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