公开(公告)号：CN115896173A

公开(公告)日：2023-04-04

申请号：CN202211370352.7

申请日：2022-11-03

申请人： 南京农业大学

发明人： 平继辉 ,  卢渊录 ,  曾亦然 ,  赵令才 ,  王蔚怡 ,  刘鹏 ,  辛震东 ,  张海涛

IPC分类号： C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  C12N15/50 ,  C12N7/00 ,  A61K39/215 ,  A61P31/14 ,  C12Q1/70 ,  C12Q1/02 ,  C12R1/93

摘要： 本发明公开了一种快速构建禽传染性支气管炎病毒感染性克隆的方法，构建方法包括以YAC‑BAC穿梭质粒为骨架，采用TAR技术，运用酿酒酵母高效同源重组机制，快速完成包含禽传染性支气管炎病毒基因组全长cDNA克隆的构建。本发明克服了冠状病毒IBV基因组较大难以操作；病毒基因组部分序列在细菌宿主中繁殖时的不稳定性；酶切位点不容易寻找，酶切连接效率低下等问题。同时构建以IBV病毒为载体嵌合外源报告基因的cDNA克隆，能够在以IBV为骨架的病毒载体中稳定表达外源基因，为以IBV病毒为载体嵌合外源基因的疫苗开发和表达外源报告基因的报告病毒的抗病毒药物筛选提供依据。