公开(公告)号：CN118440891A

公开(公告)日：2024-08-06

申请号：CN202410541084.3

申请日：2024-04-30

申请人： 南京农业大学

发明人： 侯黎明 ,  倪梦茹 ,  赵清波 ,  周五朵 ,  李平华 ,  黄瑞华 ,  李韬 ,  赵赶 ,  季铮瑜 ,  肖伟

IPC分类号： C12N5/077 ,  C12N15/867 ,  C12N5/10 ,  C12N15/12

摘要： 本发明属于细胞工程技术领域，具体涉及一种猪永生化肌卫星细胞及其构建方法。所述猪永生化肌卫星细胞命名为SV40转化猪干细胞T‑Pig‑MuSC，于2024年4月10日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC NO：C2024108。本发明提供的猪永生化肌卫星细胞可以连续传代40代以上，且活性和生物学特性与原代细胞基本一致；采用本发明提供的猪永生化肌卫星细胞的构建方法，可避免猪原代肌卫星细胞较为繁琐的分离过程，避免个体差异，可应用于构建猪骨骼肌体外模型和肌肉发育。

公开(公告)号：CN118389603A

公开(公告)日：2024-07-26

申请号：CN202410562641.X

申请日：2024-05-08

申请人： 南京农业大学

发明人： 侯黎明 ,  肖伟 ,  刘红林 ,  赵冠凯 ,  李韬 ,  黄瑞华 ,  李平华 ,  赵清波 ,  周五朵 ,  张倩 ,  谢袖梅

IPC分类号： C12N15/867 ,  C12N15/62 ,  C12N9/22 ,  C12N9/12 ,  C12N5/10

摘要： 本发明公开了条件性表达PE2的细胞系建立及其应用。将pCW‑PE2载体与慢病毒包装相关载体(pMD2G，psPAX)共转入293T细胞制备病毒悬液。然后将病毒悬液感染到PK15细胞系，在添加强力霉素(Dox)的条件下诱导培养72h后，利用嘌呤霉素进行药筛，最后得到存活的PK15细胞，利用免疫荧光检测其阳性率。本发明所述的条件性表达PE2的PK15细胞系(以下简称PE2‑PK15)，可以在含有Dox的条件下诱导PE2表达，反之则不表达。PE2‑PK15细胞系在进行PE编辑的时候，只需要将pegRNA转入细胞即可达到实验目的。同时，本发明可以极大简化PEs编辑实验流程，提高定点编辑效率。