一种简单的农杆菌介导大豆整体转化方法

    公开(公告)号:CN102250948A

    公开(公告)日:2011-11-23

    申请号:CN201110193918.9

    申请日:2011-07-12

    Abstract: 本发明属于植物基因工程领域,公开了一种简单的农杆菌介导大豆整体转化方法。包括如下步骤:将携带目的基因的根癌农杆菌菌体沉淀重悬于溶液A中得转化液,在大豆开花当天的早、中、晚分别利用所述的转化液对大豆花序进行处理,操作完成后加套塑料袋保湿,早上和中午分别维持3h~6h,晚上维持10h~12h;其中溶液A以水为溶剂,主要包含体积百分比浓度为0.1%-1%的非离子表面活性剂Sillwet L-77,质量百分比浓度为3%~8%的蔗糖和质量百分比浓度为0.001%~0.01%的乙酰丁香酮。本发明整个转化过程在大田条件下可完成,可大规模化进行转化实验。转化过程脱离了组织培养的限制,可缩短实验时间3-5个月。

    一种改良的农杆菌介导大豆整体转化方法

    公开(公告)号:CN108374020A

    公开(公告)日:2018-08-07

    申请号:CN201810194837.2

    申请日:2018-03-09

    Abstract: 本发明公开了一种改良的农杆菌介导大豆整体转化方法,是将含有外源DNA的质粒导入根癌农杆菌中,得到重组农杆菌,将所得到的重组农杆菌用如下溶液进行悬浮后,通过自制的工具,在大豆开花的当天下午3~4点对大豆的子房壁进行针扎和注射处理,进行遗传转化:溶剂为水,溶质是非离子表面活性剂Sillwet L-77,蔗糖和乙酰丁香酮;其中,Sillwet L-77的体积百分比浓度为0.1%-0.3%,蔗糖的质量百分比浓度为5%,乙酰丁香酮的质量百分比浓度为0.003%。利用本方法将一个大豆热激蛋白90合成相关的基因导入大豆植株中,获得转基因大豆植株。

    大豆90kDa热激蛋白家族编码基因及其应用

    公开(公告)号:CN103305532B

    公开(公告)日:2015-06-17

    申请号:CN201310243094.0

    申请日:2013-06-18

    Abstract: 本发明公开了大豆90kDa热激蛋白家族编码基因及其应用。本发明中公开的大豆90kDa热激蛋白及其编码基因GmHSP90包括12个成员,分别定位于细胞质,内质网,叶绿体以及线粒体。将其中具有代表性的5个基因分别构建的植物过表达载体35S‐GmHSP90‐pEarleyGate103转化拟南芥获得过表达的转基因拟南芥,并且得到mRNA高水平表达,过表达转GmHSP90基因植株表现出了对热胁迫和低温胁迫的耐受性提高,对渗透和干旱胁迫都表现出了一定的抗性,并且还对高浓度的钙离子表现出耐性。表明这类基因可作为目的基因过表达导入植物,提高转基因植物的综合抗性。

    大豆90kDa热激蛋白家族编码基因及其应用

    公开(公告)号:CN103305532A

    公开(公告)日:2013-09-18

    申请号:CN201310243094.0

    申请日:2013-06-18

    Abstract: 本发明公开了大豆90kDa热激蛋白家族编码基因及其应用。本发明中公开的大豆90kDa热激蛋白及其编码基因GmHSP90包括12个成员,分别定位于细胞质,内质网,叶绿体以及线粒体。将其中具有代表性的5个基因分别构建的植物过表达载体35S‐GmHSP90‐pEarleyGate103转化拟南芥获得过表达的转基因拟南芥,并且得到mRNA高水平表达,过表达转GmHSP90基因植株表现出了对热胁迫和低温胁迫的耐受性提高,对渗透和干旱胁迫都表现出了一定的抗性,并且还对高浓度的钙离子表现出耐性。表明这类基因可作为目的基因过表达导入植物,提高转基因植物的综合抗性。

    一种简单的农杆菌介导大豆整体转化方法

    公开(公告)号:CN102250948B

    公开(公告)日:2013-02-20

    申请号:CN201110193918.9

    申请日:2011-07-12

    Abstract: 本发明属于植物基因工程领域,公开了一种简单的农杆菌介导大豆整体转化方法。包括如下步骤:将携带目的基因的根癌农杆菌菌体沉淀重悬于溶液A中得转化液,在大豆开花当天的早、中、晚分别利用所述的转化液对大豆花序进行处理,操作完成后加套塑料袋保湿,早上和中午分别维持3h~6h,晚上维持10h~12h;其中溶液A以水为溶剂,主要包含体积百分比浓度为0.1%-1%的非离子表面活性剂Sillwet L-77,质量百分比浓度为3%~8%的蔗糖和质量百分比浓度为0.001%~0.01%的乙酰丁香酮。本发明整个转化过程在大田条件下可完成,可大规模化进行转化实验。转化过程脱离了组织培养的限制,可缩短实验时间3-5个月。

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