公开(公告)号：CN101307318A

公开(公告)日：2008-11-19

申请号：CN200810123995.5

申请日：2008-06-16

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 李英 ,  高红亮 ,  侯喜林 ,  史公军

IPC: C12N15/53 ,  C12N15/82 ,  C12Q1/68 ,  A01H1/00 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明涉及不结球白菜GLDH基因提高乌塌菜Vc含量的应用，属于分子生物学和生物技术领域。利用RT－PCR技术获得了GLDH基因完整编码区序列，进一步构建其植物过量表达载体，导入农杆菌LBA4404。优化含培养基配方及操作流程等技术方案，建立了乌塌菜转基因遗传转化体系。采用农杆菌介导法将植物过量表达载体转化乌塌菜。通过卡那霉素抗性筛选获得转基因植株，运用PCR技术进行目的基因整合乌塌菜基因组的鉴定。本发明验证了该基因在Vc合成途径中的重要作用，成功获得过量表达GLDH的转基因植株，与非转基因植株相比，转基因植株的GLDH基因表达量最高为对照的28.5倍，植株Vc含量最高为对照的1.8倍。为以后通过基因工程提高蔬菜品质提供了理论依据和实践经验。

公开(公告)号：CN101307318B

公开(公告)日：2010-09-15

申请号：CN200810123995.5

申请日：2008-06-16

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 李英 ,  高红亮 ,  侯喜林 ,  史公军

IPC: C12N15/53 ,  C12N15/82 ,  C12Q1/68 ,  A01H1/00 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明涉及不结球白菜GLDH基因提高乌塌菜Vc含量的应用，属于分子生物学和生物技术领域。利用RT-PCR技术获得了GLDH基因完整编码区序列，进一步构建其植物过量表达载体，导入农杆菌LBA4404。优化含培养基配方及操作流程等技术方案，建立了乌塌菜转基因遗传转化体系。采用农杆菌介导法将植物过量表达载体转化乌塌菜。通过卡那霉素抗性筛选获得转基因植株，运用PCR技术进行目的基因整合乌塌菜基因组的鉴定。本发明验证了该基因在Vc合成途径中的重要作用，成功获得过量表达GLDH的转基因植株，与非转基因植株相比，转基因植株的GLDH基因表达量最高为对照的28.5倍，植株Vc含量最高为对照的1.8倍。为以后通过基因工程提高蔬菜品质提供了理论依据和实践经验。