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公开(公告)号:CN118109381A
公开(公告)日:2024-05-31
申请号:CN202410321612.4
申请日:2024-03-20
申请人: 南京工业大学
IPC分类号: C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/54 , C12N15/60 , C12P13/00 , C07C209/84 , C07C209/86 , C07C211/09 , C12R1/19
摘要: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种催化合成丁二胺的基因工程菌及其构建方法与应用。本发明通过过表达鸟氨酸脱羧酶基因SpeC,精氨酸激酶基因ARG1和吡哆醛激酶基因pdxK,构建得到的了重组大肠杆菌TAC。本发明以重组大肠杆菌TAC经诱导表达后的细胞液作为催化剂,以精氨酸为底物,全细胞催化合成生产丁二胺,该催化体系过程简单温和,对环境、设备及操作人员均无害。从催化结果看,重组大肠杆菌TAC能够催化0.75M精氨酸生产含57.45g/L丁二胺的催化反应液,转化率达到99%以上。通过对催化液中的丁二胺进行膜分离、蒸馏除水、碱化浓缩液、有机萃取剂萃取、精馏,成功从有机相中分离出了纯度为99.9%丁二胺。
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公开(公告)号:CN117802025A
公开(公告)日:2024-04-02
申请号:CN202410019280.4
申请日:2024-01-05
申请人: 南京工业大学
摘要: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种生产丁二胺的重组大肠杆菌及其构建方法与应用。本发明通过从头合成牛源的精氨酸激酶基因ARG1和内源的大肠杆菌鸟氨酸脱羧酶基因SpeC,构建质粒pTrc99a‑ARG1‑SpeC并转化至大肠杆菌ARGFM,获得单质粒的重组大肠杆菌PUTFM。该菌在特定培养基中生长良好。发酵时,通过在特定时段加入诱导剂IPTG,内源及异源基因均表达稳定。该反应体系简单、条件温和、周期适宜、副产物少,且清洁无污染,是一条简单、快速、高效的生产途径,从发酵结果看,重组大肠杆菌PUTFM能够稳定生产含14.8g/L丁二胺的发酵液,具有较高的产业化前景。
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