一种利用连续色谱技术分离丁三醇发酵液的工艺

    公开(公告)号:CN109651087A

    公开(公告)日:2019-04-19

    申请号:CN201910094659.0

    申请日:2019-01-30

    IPC分类号: C07C29/74 C07C29/76 C07C31/22

    摘要: 本发明公开了一种利用连续色谱技术分离丁三醇发酵液的工艺,将丁三醇发酵液经过离心和超滤处理后,得到的清液泵入装有吸附树脂的连续分离装置中进行吸附,再用低沸点的有机溶剂或者所述有机溶剂的水溶液作为解吸剂进行解吸,即可得产品丁三醇,以纯水作为再生剂进行吸附剂再生。本发明利用洗脱竞争作用,通过连续装置实现丁三醇分离纯化的目的,产品液中的丁三醇可高达2%~5%以上,纯度98%以上,平均收率99%以上,丁三醇的浓度经过色谱分离过程得到了提高,为进一步通过传统精馏法浓缩丁三醇节省了大量的能耗。

    糖基转移酶突变体及其在酶法制备稀有人参皂苷中的应用

    公开(公告)号:CN116144623A

    公开(公告)日:2023-05-23

    申请号:CN202211138039.0

    申请日:2022-09-19

    摘要: 本发明涉及糖基转移酶突变体及其在酶法制备稀有人参皂苷中的应用。对糖基转移酶UGTBL1进行定点突变,获得的突变体可高效定向制备稀有人参皂苷Rh1,酶法制备稀有人参皂苷Rh1的区域选择性达96.26%(转化率95.56%)。糖基转移酶UGTBL1一些其它的突变体还可以定向合成非天然人参皂苷原人参三醇‑3‑O‑β‑葡萄糖苷(3‑O‑β‑Glc‑PPT),酶法制备非天然人参皂苷3‑O‑β‑Glc‑PPT的区域选择性达84.83%(转化率98.13%)。本发明利用糖基转移酶UGTBL1的突变体与蔗糖合成酶AtSuSy构成的双酶偶联催化体系制备Rh1或3‑O‑β‑Glc‑PPT,并利用分批补料方法显著提升稀有人参皂苷Rh1和3‑O‑β‑Glc‑PPT的产物浓度水平,简化制备过程;产物较为单一,有助于减少后续的分离步骤,精简产物提纯过程。3‑O‑β‑Glc‑PPT可用于制备肿瘤等疾病治疗的药物,具有广阔的新药开发前景。

    一种利用连续色谱技术分离丁三醇发酵液的工艺

    公开(公告)号:CN109651087B

    公开(公告)日:2020-12-04

    申请号:CN201910094659.0

    申请日:2019-01-30

    IPC分类号: C07C29/74 C07C29/76 C07C31/22

    摘要: 本发明公开了一种利用连续色谱技术分离丁三醇发酵液的工艺,将丁三醇发酵液经过离心和超滤处理后,得到的清液泵入装有吸附树脂的连续分离装置中进行吸附,再用低沸点的有机溶剂或者所述有机溶剂的水溶液作为解吸剂进行解吸,即可得产品丁三醇,以纯水作为再生剂进行吸附剂再生。本发明利用洗脱竞争作用,通过连续装置实现丁三醇分离纯化的目的,产品液中的丁三醇可高达2%~5%以上,纯度98%以上,平均收率99%以上,丁三醇的浓度经过色谱分离过程得到了提高,为进一步通过传统精馏法浓缩丁三醇节省了大量的能耗。

    糖基转移酶突变体及其在制备槲皮素-3-O鼠李糖苷中的应用

    公开(公告)号:CN116355874A

    公开(公告)日:2023-06-30

    申请号:CN202310138546.2

    申请日:2023-02-20

    IPC分类号: C12N9/10 C12P19/60 C12P19/18

    摘要: 本发明涉及糖基转移酶突变体及其在制备槲皮素‑3‑O鼠李糖苷中的应用,通过将葡萄糖基转移酶AtUGT78D2氨基酸序列C‑端PSPG结构域的44个氨基酸替换为糖基转移酶AtUGT78D1的C‑端PSPG结构域的44个氨基酸,获得结构域工程改造的糖基转移酶AtUGT78D2‑D1PSPG;再将糖基转移酶AtUGT78D2‑D1PSPG进行定点突变,获取选择性好、稳定性好、表达量高的鼠李糖基转移酶突变体,本发明还提供了利用蔗糖合酶AtSuSy、UDP‑鼠李糖合成酶AtRHM‑NRS、糖基转移酶AtUGT78D2‑D1PSPG突变体构建的三酶偶联催化合成槲皮素‑3‑O‑鼠李糖苷的反应体系,实现了以蔗糖为底物,在UDP‑鼠李糖合成酶的作用下生成UDP‑鼠李糖供体,减少了UDP‑鼠李糖供体购买的生产成本,进而在糖基转移酶的作用下,催化槲皮素一步法定向合成槲皮素‑3‑O‑鼠李糖苷。