公开(公告)号：CN110184258B

公开(公告)日：2020-11-06

申请号：CN201910501002.1

申请日：2019-06-11

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 段绪果 ,  栾舒越 ,  张心怡 ,  沈镇炎 ,  朱秋雨 ,  赵林果 ,  史洁莹

IPC: C12N9/44 ,  C12N15/56 ,  C12P19/22 ,  C12P19/20 ,  C12P19/16 ,  C12P19/14

Abstract: 本发明公开了一种普鲁兰酶突变体，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明的普鲁兰酶突变体的热稳定性和催化效率较野生型有了明显的改善，其中，F513Y在55℃下的酶活可达最适温度下酶活的81.96％，在40℃下的半衰期可达78h，Kcat/Km可达962.91s‑1·mg‑1·mL，分别为野生型的2.2倍、2.6倍和1.8倍；507‑13在55℃下的酶活可达最适温度下酶活的84.60％，在40℃下的半衰期可达65h，Kcat/Km可达639.37s‑1·mg‑1·mL，分别为野生型的2.3倍、2.2倍和1.2倍；507‑11的Kcat/Km可达617.85s‑1·mg‑1·mL，是野生型的1.2倍。

公开(公告)号：CN110184258A

公开(公告)日：2019-08-30

申请号：CN201910501002.1

申请日：2019-06-11

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 段绪果 ,  栾舒越 ,  张心怡 ,  沈镇炎 ,  朱秋雨 ,  赵林果 ,  史洁莹

IPC: C12N9/44 ,  C12N15/56 ,  C12P19/22 ,  C12P19/20 ,  C12P19/16 ,  C12P19/14

Abstract: 本发明公开了一种普鲁兰酶突变体，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明的普鲁兰酶突变体的热稳定性和催化效率较野生型有了明显的改善，其中，F513Y在55℃下的酶活可达最适温度下酶活的81.96％，在40℃下的半衰期可达78h，Kcat/Km可达962.91s-1·mg-1·mL，分别为野生型的2.2倍、2.6倍和1.8倍；507-13在55℃下的酶活可达最适温度下酶活的84.60％，在40℃下的半衰期可达65h，Kcat/Km可达639.37s-1·mg-1·mL，分别为野生型的2.3倍、2.2倍和1.2倍；507-11的Kcat/Km可达617.85s-1·mg-1·mL，是野生型的1.2倍。

公开(公告)号：CN110343687B

公开(公告)日：2023-05-09

申请号：CN201910650235.8

申请日：2019-07-18

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 段绪果 ,  朱秋雨 ,  张心怡 ,  沈镇炎 ,  金璐 ,  栾舒越 ,  史洁莹 ,  刘龙

IPC: C12N9/44 ,  C12N15/56 ,  C12P19/16 ,  C12P19/14 ,  C12P19/04

Abstract: 本发明公开了一种具有高分泌能力的普鲁兰酶突变体及其应用，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明普鲁兰酶突变体胞外分泌能力较野生型有了明显的提高，将携带编码本发明普鲁兰酶突变体PulBd‑306的基因的大肠杆菌摇瓶诱导发酵44h，即可使发酵液上清液中的胞外酶活达38.9U·mL‑1，是野生型的2.3倍；将携带编码本发明普鲁兰酶突变体PulBd‑117的基因的大肠杆菌摇瓶诱导发酵44h，即可使发酵液上清液中的胞外酶活达49.6U·mL‑1，是野生型的2.9倍。

公开(公告)号：CN110343687A

公开(公告)日：2019-10-18

申请号：CN201910650235.8

申请日：2019-07-18

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 段绪果 ,  朱秋雨 ,  张心怡 ,  沈镇炎 ,  金璐 ,  栾舒越 ,  史洁莹 ,  刘龙

IPC: C12N9/44 ,  C12N15/56 ,  C12P19/16 ,  C12P19/14 ,  C12P19/04

Abstract: 本发明公开了一种具有高分泌能力的普鲁兰酶突变体及其应用，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明普鲁兰酶突变体胞外分泌能力较野生型有了明显的提高，将携带编码本发明普鲁兰酶突变体PulBd-306的基因的大肠杆菌摇瓶诱导发酵44h，即可使发酵液上清液中的胞外酶活达38.9U·mL-1，是野生型的2.3倍；将携带编码本发明普鲁兰酶突变体PulBd-117的基因的大肠杆菌摇瓶诱导发酵44h，即可使发酵液上清液中的胞外酶活达49.6U·mL-1，是野生型的2.9倍。