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公开(公告)号:CN108330132B
公开(公告)日:2021-06-18
申请号:CN201810123435.3
申请日:2018-02-07
申请人: 南京林业大学
摘要: 本发明公开了一种人工合成cry1Ah1基因及其应用,该人工合成cry1Ah1基因的碱基序列如SEQ ID NO.2所示或如SEQ ID NO.3所示。本发明选取Bt杀虫基因crylAh1基因野生型序列为原始序列对cry1Ah1基因编码区全长起始密码子开始第64nt‑1998nt杀虫关键区域共645个氨基酸,在不改变原有氨基酸一级序列的前提下进行密码子优化,获得cry1Ah1‑B基因和cry1Ah1‑U基因,将优化后的基因与优化前基因的所有基因翻译的蛋白经过tBlastX比较均完全一致。对转cry1Ah1改造基因植株的RT‑PCR鉴定分析,表明cry1Ah1‑B、cry1Ah1‑U与野生cry1Ah1基因表达效率有明显差别,转Bt基因杨树的ELISA测定结果表明,包括对照组在内的所有株系总蛋白量保持在24.013mg/g~26.667mg/g之间,虫试结果较为良好的株系中A‑3‑4、A‑5‑0、A‑5‑23和Z‑1‑3四个株系的毒蛋白含量在4669.38ng/g~9342.33ng/g之间,抗虫效果明显。
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公开(公告)号:CN108330132A
公开(公告)日:2018-07-27
申请号:CN201810123435.3
申请日:2018-02-07
申请人: 南京林业大学
摘要: 本发明公开了一种人工合成cry1Ah1基因及其应用,该人工合成cry1Ah1基因的碱基序列如SEQ ID NO.2所示或如SEQ ID NO.3所示。本发明选取Bt杀虫基因crylAh1基因野生型序列为原始序列对cry1Ah1基因编码区全长起始密码子开始第64nt-1998nt杀虫关键区域共645个氨基酸,在不改变原有氨基酸一级序列的前提下进行密码子优化,获得cry1Ah1-B基因和cry1Ah1-U基因,将优化后的基因与优化前基因的所有基因翻译的蛋白经过tBlastX比较均完全一致。对转cry1Ah1改造基因植株的RT-PCR鉴定分析,表明cry1Ah1-B、cry1Ah1-U与野生cry1Ah1基因表达效率有明显差别,转Bt基因杨树的ELISA测定结果表明,包括对照组在内的所有株系总蛋白量保持在24.013mg/g~26.667mg/g之间,虫试结果较为良好的株系中A-3-4、A-5-0、A-5-23和Z-1-3四个株系的毒蛋白含量在4669.38ng/g~9342.33ng/g之间,抗虫效果明显。
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公开(公告)号:CN102876678B
公开(公告)日:2013-10-16
申请号:CN201210382844.8
申请日:2012-10-11
申请人: 南京林业大学
IPC分类号: C12N15/113
摘要: 本发明公开了一种植物维管组织特异表达启动子及其表达载体和应用,植物维管组织特异表达启动子为真菌诱导型启动子,核苷酸序列如SEQNO1所示。含有植物维管组织特异表达启动子的表达载体为pJIT166-pPeTLP2-GFP融合表达载体和pBin-pPeTLP2-GUS融合表达载体。该植物维管组织特异表达启动子可以驱动目的基因在转基因植株的维管部位高效特异表达,在其他部位不表达。应用本发明的启动子在杨树育种工程中,可用来培育抗真菌病杨树新品种。
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公开(公告)号:CN102876678A
公开(公告)日:2013-01-16
申请号:CN201210382844.8
申请日:2012-10-11
申请人: 南京林业大学
IPC分类号: C12N15/113 , C12N15/82 , C12N15/84 , A01H5/00
摘要: 本发明公开了一种植物维管组织特异表达启动子及其表达载体和应用,植物维管组织特异表达启动子为真菌诱导型启动子,核苷酸序列如SEQNO1所示。含有植物维管组织特异表达启动子的表达载体为pJIT166-pPeTLP2-GFP融合表达载体和pBin-pPeTLP2-GUS融合表达载体。该植物维管组织特异表达启动子可以驱动目的基因在转基因植株的维管部位高效特异表达,在其他部位不表达。应用本发明的启动子在杨树育种工程中,可用来培育抗真菌病杨树新品种。
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