公开(公告)号：CN107142310B

公开(公告)日：2021-06-29

申请号：CN201710367068.7

申请日：2017-05-23

申请人： 南通市第一人民医院 ,  南通大学

发明人： 陈建荣 ,  姚敏 ,  董志珍 ,  杨绪莉 ,  王理 ,  姚登福

IPC分类号： C12Q1/6886 ,  C12Q1/02 ,  G01N33/574

摘要： 本发明公开了特异性shRNA筛选及其靶向Ang‑2基因抑制肺癌细胞的验证方法，经细胞复苏、细胞培养、细胞转染、干扰前后实时荧光定量PCR检测Ang‑2表达、干扰前后细胞中蛋白表达分析、CCK‑8方法检测干扰Ang‑2基因前后的肺癌细胞增殖能力及干扰前后细胞侵袭、迁移能力改变的检测的步骤完成对特异性shRNA的筛选及其靶向Ang‑2基因抑制肺癌细胞的验证；本发明实现筛选对Ang‑2基因转录干扰具有特异性Ang‑2‑shRNA1有效质粒转染肺癌细胞，同时能够验证了特异性shRNA靶向干扰Ang‑2能够有效抑制癌细胞的增殖、侵袭、迁移等生物学能力，为治疗肺癌提供一种新的治疗方向，抑制Ang‑2弥补抗VEGFR单一疗法的局限性。

公开(公告)号：CN107142310A

公开(公告)日：2017-09-08

申请号：CN201710367068.7

申请日：2017-05-23

申请人： 南通市第一人民医院 ,  南通大学

发明人： 陈建荣 ,  姚敏 ,  董志珍 ,  杨绪莉 ,  王理 ,  姚登福

IPC分类号： C12Q1/68 ,  C12Q1/02 ,  G01N33/574

CPC分类号： C12Q1/6886 ,  C12Q2600/118 ,  C12Q2600/136 ,  C12Q2600/158 ,  G01N33/5011 ,  G01N33/57423 ,  G01N33/57496 ,  G01N2333/515 ,  G01N2500/04 ,  G01N2500/10

摘要： 本发明公开了特异性shRNA筛选及其靶向Ang‑2基因抑制肺癌细胞的验证方法，经细胞复苏、细胞培养、细胞转染、干扰前后实时荧光定量PCR检测Ang‑2表达、干扰前后细胞中蛋白表达分析、CCK‑8方法检测干扰Ang‑2基因前后的肺癌细胞增殖能力及干扰前后细胞侵袭、迁移能力改变的检测的步骤完成对特异性shRNA的筛选及其靶向Ang‑2基因抑制肺癌细胞的验证；本发明实现筛选对Ang‑2基因转录干扰具有特异性Ang‑2‑shRNA1有效质粒转染肺癌细胞，同时能够验证了特异性shRNA靶向干扰Ang‑2能够有效抑制癌细胞的增殖、侵袭、迁移等生物学能力，为治疗肺癌提供一种新的治疗方向，抑制Ang‑2弥补抗VEGFR单一疗法的局限性。