一种孕酮抗体、制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN115975028B

    公开(公告)日:2023-08-29

    申请号:CN202211359243.5

    申请日:2022-11-02

    Abstract: 本发明提供一种孕酮抗体、制备方法及其应用。所述孕酮抗体的重链序列如SEQ ID NO:2所示,其轻链序列分别如SEQ ID NO:3‑5所示。所述制备方法包括以下步骤:S1,以已知孕酮抗体晶体结构为模板,通过同源建模分析对接结果,获得孕酮抗体识别孕酮的关键位点;S2,对步骤S1获得的关键位点进行定点突变,构建抗体突变基因,再构建表达载体进行突变抗体表达;S3,纯化突变抗体,进行抗原抗体亲和力测试和抗体性能测试,筛选出高亲和力的孕酮抗体。所述孕酮抗体的抗原亲和力高和抗原结合稳定性好。

    抗25-OH维生素D3的重组单链抗体及其制备、应用

    公开(公告)号:CN117887761A

    公开(公告)日:2024-04-16

    申请号:CN202410089277.X

    申请日:2024-01-22

    Abstract: 本发明提供了一种抗25‑OH维生素D3的重组单链抗体及其制备、应用。所述制备方法包括:S1,合成25‑OH‑VD3‑scFv单链抗体序列,然后插入至PTT5载体中,并转染含单链抗体序列的PTT5载体至HEK293细胞中,培养并收集细胞培养物上清液;S2,将所述细胞培养物上清液用N i Sepharose Exce l填料进行目的蛋白的富集,获取洗脱组分;S3,将所述洗脱组分采用Nuvi a HP Q阴离子交换填料进行分离纯化,获取穿透组分;S4,将所述穿透组分的pH调节至6.0±0.5,再用缓冲液及氯化钠溶液将所述穿透组分的电导率调节至12.0±1.0mS/cm;S5,采用Capto SP ImpRes阳离子交换填料进行线性梯度洗脱40个柱床体积,然后对梯度内的不同洗脱峰进行分类收集,得到抗25‑OH维生素D3的重组单链抗体。

    一种孕酮抗体、制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN115975028A

    公开(公告)日:2023-04-18

    申请号:CN202211359243.5

    申请日:2022-11-02

    Abstract: 本发明提供一种孕酮抗体、制备方法及其应用。所述孕酮抗体的重链序列如SEQ ID NO:2所示,其轻链序列分别如SEQ ID NO:3‑5所示。所述制备方法包括以下步骤:S1,以已知孕酮抗体晶体结构为模板,通过同源建模分析对接结果,获得孕酮抗体识别孕酮的关键位点;S2,对步骤S1获得的关键位点进行定点突变,构建抗体突变基因,再构建表达载体进行突变抗体表达;S3,纯化突变抗体,进行抗原抗体亲和力测试和抗体性能测试,筛选出高亲和力的孕酮抗体。所述孕酮抗体的抗原亲和力高和抗原结合稳定性好。

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