公开(公告)号：CN117050980A

公开(公告)日：2023-11-14

申请号：CN202311318816.4

申请日：2023-10-12

Applicant: 吉林大学

Inventor： 杨勇 ,  刘晓雷 ,  李承瑶 ,  刘一 ,  唐斌 ,  刘明远

IPC: C12N9/76 ,  G01N30/02 ,  C12N15/57 ,  C12N15/70 ,  G01N33/573 ,  G01N33/543 ,  G01N33/58

Abstract: 本发明适用于生物检测技术领域，提供了一种Ts‑TTPA抗原在制备旋毛虫病早期诊断试剂中的应用，包括：进行旋毛虫肌幼虫胞外囊泡的分离与鉴定；通过LC‑MS/MS鉴定蛋白质；筛选目标蛋白Ts‑TTPA；进行蛋白质表达和纯化，得到rTs‑TTPA；对rTs‑TTPA进行聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白免疫印迹分析；进行酶联免疫吸附实验。本发明采用LC‑MS/MS结合生物信息学分析方法，筛选出旋毛虫肌幼虫胞外囊泡蛋白，并利用其构建间接ELISA的检测方法，能够在7 dpi检测到受感染的血清，3份感染1000条旋毛虫的猪血清在13 dpi时被完全检出；本方法填补了旋毛虫IgG检测的窗口期，并且有利于临床早期诊断。