一种ASFV-PRV的多重实时荧光定量PCR检测体系及检测方法

    公开(公告)号:CN117305520A

    公开(公告)日:2023-12-29

    申请号:CN202311535462.9

    申请日:2023-11-17

    申请人: 吉林大学

    摘要: 本发明涉及一种ASFV‑PRV的多重实时荧光定量PCR检测体系及检测方法,属于生物检测技术领域。克服了现有技术中存在的不能快速、敏感和准确定量检测非洲猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒野毒株和猪伪狂犬病毒疫苗株的缺陷。本发明的ASFV‑PRV的多重实时荧光定量PCR检测体系,包括PRV‑gD引物组、PRV‑gE引物组、ASFV引物组、PRV‑gD探针、PRV‑gE探针和ASFV探针。本发明的检测体系特异性和准确率高,灵敏度高,在进行病原体定性分析的同时还能进行病原体定量分析,定量线性范围好;本发明检测方法检测周期短、检测效率高,操作简单、易于推广,具有潜在的应用价值。

    一种羊传染性脓疱病毒减毒株的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN114657154B

    公开(公告)日:2024-01-12

    申请号:CN202011528341.8

    申请日:2020-12-22

    申请人: 吉林大学

    摘要: 本发明提供了一种羊传染性脓疱病毒减毒株的制备方法,通过将目标基因突变的方式制备,所述目标基因为羊传染性脓疱病毒ORF120基因。所述缺失ORF120基因的羊传染性脓疱病毒是采用基因工程手段,利用同源重组的方法从ORFV‑SY17分离株全基因组中敲除ORF120基因,以此达到毒力减弱的目的,并以绿色荧光蛋白EGFP作为标记蛋白代替缺失的基因,命名为ORFV‑SY17Δ120减毒株。在此基础上,拯救出其互补株ORFV‑SY17‑Rv120,并以红色荧光蛋白RFP作为筛选标识。经过本源动物羔羊动物接种实验表明,本发明所述的ORF120单基因缺失羊传染性脓疱病毒减毒株具有良好的使用安全性,为羊传染性脓疱病毒减毒活疫苗的开发以及ORF120基因功能的探究提供技术支持。

    猪血凝性脑脊髓炎病毒全长感染性克隆质粒及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN117887762A

    公开(公告)日:2024-04-16

    申请号:CN202410091956.0

    申请日:2024-01-23

    申请人: 吉林大学

    摘要: 猪血凝性脑脊髓炎病毒全长感染性克隆质粒及其构建方法与应用,属于遗传平台技术领域。本发明的构建方法,先消除PBeloBAC11载体上的两个KpnI酶切位点,然后在pBeloBAC11的5'末端引入人巨细胞病毒启动子和猪血凝性脑脊髓炎病毒5'UTR,在pBeloBAC11的3'末端引入猪血凝性脑脊髓炎病毒3'UTR、PolyA、丁型肝炎病毒核酶序列以及牛生长素,并插入多克隆酶切位点,得到修饰的pBeloBAC11载体;再采用八个酶切位点将猪血凝性脑脊髓炎病毒全基因组分割为五个基因片段,并扩增,最后将扩增后的基因片段连接至修饰的pBeloBAC11载体上。该克隆质粒可作为反向遗传平台。

    和厚朴酚在制备治疗猪血凝性脑脊髓炎病毒感染药物中的应用

    公开(公告)号:CN114376996A

    公开(公告)日:2022-04-22

    申请号:CN202210036347.6

    申请日:2022-01-13

    申请人: 吉林大学

    IPC分类号: A61K31/05 A61P31/14

    摘要: 本发明涉及一种和厚朴酚在制备治疗猪血凝性脑脊髓炎病毒感染药物中的应用,属于医药技术领域。本发明具体通过对体外猪血凝性脑脊髓炎病毒感染细胞模型和体内猪血凝性脑脊髓炎病毒感染小鼠模型试验进行研究,结果显示和厚朴酚在体内外均能直接在基因和蛋白水平上抑制猪血凝性脑脊髓炎病毒的复制,降低病毒滴度,证明和厚朴酚有显著的抗猪血凝性脑脊髓炎病毒的作用,可用于制备抗猪血凝性脑脊髓炎病毒感染新药的开发,并对药物靶标的确认有重要的意义。

    一种羊传染性脓疱病毒减毒株的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN114657154A

    公开(公告)日:2022-06-24

    申请号:CN202011528341.8

    申请日:2020-12-22

    申请人: 吉林大学

    摘要: 本发明提供了一种羊传染性脓疱病毒减毒株的制备方法,通过将目标基因突变的方式制备,所述目标基因为羊传染性脓疱病毒ORF120基因。所述缺失ORF120基因的羊传染性脓疱病毒是采用基因工程手段,利用同源重组的方法从ORFV‑SY17分离株全基因组中敲除ORF120基因,以此达到毒力减弱的目的,并以绿色荧光蛋白EGFP作为标记蛋白代替缺失的基因,命名为ORFV‑SY17Δ120减毒株。在此基础上,拯救出其互补株ORFV‑SY17‑Rv120,并以红色荧光蛋白RFP作为筛选标识。经过本源动物羔羊动物接种实验表明,本发明所述的ORF120单基因缺失羊传染性脓疱病毒减毒株具有良好的使用安全性,为羊传染性脓疱病毒减毒活疫苗的开发以及ORF120基因功能的探究提供技术支持。