公开(公告)号：CN104488694A

公开(公告)日：2015-04-08

申请号：CN201410646659.4

申请日：2014-11-14

申请人： 吉林省农业科学院 ,  吉林吉农高新技术发展股份有限公司

发明人： 刘文国 ,  路明 ,  岳尧海 ,  张志军 ,  王敏 ,  刘宏伟 ,  周旭东 ,  赵万庆 ,  张建新 ,  马英杰 ,  张佩 ,  李岩 ,  王绍平

IPC分类号： A01H1/02 ,  C12Q1/68

摘要： 本发明属于作物育种领域，具体为一种快速培育转基因玉米自交系的方法。该方法包括如下步骤：1)转基因基础材料组配：将转基因阳性材料与优良玉米自交系杂交；2)杂交诱导：利用诱导系与转基因基础材料进行杂交；3)单倍体鉴选：通过籽粒和田间植株鉴选单倍体植株；4)单倍体加倍：利用自然或人工化学加倍方法对单倍体植株进行加倍并自交；5)转基因DH系鉴定：对获得的DH系进行PCR水平检测，确认含有目标基因的转基因自交系。本发明方法大大缩短了转基因玉米自交系的培育过程。

公开(公告)号：CN104488694B

公开(公告)日：2020-04-21

申请号：CN201410646659.4

申请日：2014-11-14

申请人： 吉林省农业科学院 ,  吉林吉农高新技术发展股份有限公司

发明人： 刘文国 ,  路明 ,  岳尧海 ,  张志军 ,  王敏 ,  刘宏伟 ,  周旭东 ,  赵万庆 ,  张建新 ,  马英杰 ,  张佩 ,  李岩 ,  王绍平

IPC分类号： A01H1/02 ,  C12Q1/6895

摘要： 本发明属于作物育种领域，具体为一种快速培育转基因玉米自交系的方法。该方法包括如下步骤：1)转基因基础材料组配：将转基因阳性材料与优良玉米自交系杂交；2)杂交诱导：利用诱导系与转基因基础材料进行杂交；3)单倍体鉴选：通过籽粒和田间植株鉴选单倍体植株；4)单倍体加倍：利用自然或人工化学加倍方法对单倍体植株进行加倍并自交；5)转基因DH系鉴定：对获得的DH系进行PCR水平检测，确认含有目标基因的转基因自交系。本发明方法大大缩短了转基因玉米自交系的培育过程。

公开(公告)号：CN105647895A

公开(公告)日：2016-06-08

申请号：CN201610223297.7

申请日：2016-04-12

申请人： 吉林省农业科学院

发明人： 刘文国 ,  王云鹏 ,  路明 ,  张志军 ,  王敏 ,  吕庆雪 ,  赵万庆 ,  岳尧海 ,  刘宏伟 ,  张建新 ,  马英杰 ,  周旭东 ,  孟令聪 ,  李岩

IPC分类号： C12N9/64 ,  C12N15/82 ,  A01H5/10

CPC分类号： C12N9/6483 ,  C12N15/8205 ,  C12N15/8257 ,  C12N2800/22 ,  C12N2800/60 ,  C12Y304/23004

摘要： 本发明公开了一种转基因玉米种子中羊凝乳酶的表达方法，包括以下步骤：通过PCR法克隆玉米globulin-1基因的启动子Glzm1，在启动子上下游分别添加HindIII和NcoI酶切位点，亚克隆到植物表达载体pCAMBIA3301上，替换GUS基因前面的35S启动子；在羊凝乳酶基因编码氨基酸的N端添加6个组氨酸，根据玉米密码子偏好性对进行密码子优化，并在基因上下游分别添加NcoI和BstEII酶切位点，序列设计好后进行合成；合成后的序列替换植物表达载体上的GUS基因，最终成功构建玉米籽粒特异性表达载体pC330-Gprochymosin。本发明的有益效果为：(1)生产的重组蛋白可进行翻译后修饰如糖蛋白和多亚基蛋白，与天然蛋白产物具有相同或相似的结构和生物学功能；(2)具有本质的安全性，不会传播动物病毒或是感染病原菌。